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流式细胞术原理 流式细胞术的技术原理及其应用 张绪 生科2班 1213223 流式细胞术的技术原理及其应用 流式细胞术是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。其主要的原理是一束单色光(通常是激光)照到流体力学聚焦的一股流体上。若干个检测器瞄向流束和激光相交的这个点，其中一个和激光在同一直线上(称作前散射(FSC))，其它几个和激光垂直(旁散射(SSC)和一个或几个荧光监测器)。当每个悬浮颗粒通过光束时会按某种方式把光散射，同时所带有的荧光化合物被激发并发射出频率低于激发光的荧光。这些散射光和荧光的组合数据被检测器记录，根据各检测器亮度的波动(每个细胞会显出一个散射或荧光的峰)就能够推算出每个颗粒的物理和化学性质。前散射与细胞体积相关，而旁散 1 射取决于颗粒的内部复杂程 度(比如核的形状、胞质内 颗粒的种类或者末的粗糙程 度)。工作原理可用图示表示。 流式细胞术可以检测的 参数有很多，包括:细胞的 体积和形态复杂程度、细胞 中的色素、DNA(细胞周期分 析、细胞动力学、细胞增殖 等)、RNA、染色体分析和分 选(文库构建、染色体涂染)、 蛋白质、细胞表面抗原(CD 标记)、胞内抗原(各种细胞 因子(cytokine)、次级媒介 等)、核抗原等。 流式细胞术的应用也是十分广泛的，在分子生物学中，它主要用于荧光标记的抗体;通过DNA含量分析的细胞周期分布，也可反映肿瘤细胞的增殖状态，对治疗及预后有十分重要的意义。 具体的应用方面有利用流式细胞来定量的测定海洋中碳和氮的固定率，了解海洋碳和氮循环的互联互通，特别是碳和氮的固定，在阐明碳、氮的命运和分布在海洋中是必不可少 2 的。而利用流式细胞术开发了一种新的方法， 既定量生物体 来推算碳氮的固定率。从理论上讲，在一个生态系统的水平，如果生物固氮的精确测量可以进行，那么固碳和食物网的生产也可以估算。 还有一项比较实用的应用是用流式细胞术来区分具有麻醉效果和不具有麻醉效果的罂粟，其基本原理是通过流式细胞仪测定在营养生长期细胞核DNA的相对含量，根据核DNA含量的不同区分三种罂粟:P型肢内片罂粟，伪东方罂粟，和大红罂粟。而具有麻醉效果的只有大红罂粟。 百度搜索“就爱阅读”,专业资料,生活学习,尽在就爱阅读网92,您的在线图书馆 3