急性一氧化氮中毒后迟发型脑病大鼠海马区hif1α及胰岛素样生长因子1igf1的动态表达论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 四川医科大学硕士学位论文口唇、鼻、眼睛、趾端皮肤呈现明显的樱桃红色。部分大鼠出现抽搐、肢 四川医科大学硕士学位论文 口唇、鼻、眼睛、趾端皮肤呈现明显的樱桃红色。部分大鼠出现抽搐、肢 体强直、昏迷。AC组和BC组大鼠没有活动异常。(2)运用Morris水迷 宫实验检测造模是否成功：1)定位航行试验：三组大鼠在染毒前平均逃避 潜伏时间差异无统计学意义(PO．05)；染毒后第14天、21天、28天， CO组平均逃避潜伏时间较染毒前延长，与两组对照组相比，有显著性意 义(PO．01)。2)空间探索试验：①站台所在象限游走时间(第1V象限)： 染毒前三组大鼠在第1V象限游走时间无统计学意义；CO组从染毒后第7 天叶第28天在第Ⅳ象限的运动时间逐渐缩短，且各时间点均比其余两组 小，有显著性差异(P0．05)。②穿越平台次数：CO组从第l天至第28天 (第28d时低于对照组)出现降低趋势，且各时间点比对照组都小；各组 大鼠组内及组问在各时间点的实验结果无统计学意义(P0．05)。3．病理 形态学改变：光镜下观察脑组织切片HE染色标本，CO组大鼠脑海马CAl 区可见神经元变性坏死、神经细胞皱缩变形、锥体细胞数量减少、胞浆空 泡增大等；空气对照组和空白对照组各时间点大鼠脑组织明显病理学改变 不明显。4．HIF．10t及IGF．1蛋白表达：(1)免疫组化染色：@HIF．10t：CO 组大鼠在染毒后第1天到第28天呈现先升高，至第3天达高峰后开始逐渐 降低，但其各个时间点的表达量均高于两个对照组，差异具有显著性 (PO．01)；对照组各时间点表达量无统计学意义。②IGF．1：CO组从第 1天一第28天表现为增高_降低_增高_降低的动态变化趋势，而AC组、 BC组的表达量均比CO组低，结果具有显著性(P0．01)，空气对照组及空 白对照组的结果差异无显著性。(2)半定量Western Blot法检测蛋白表达： 与内参B．actin条带相比较， CO组IGF．1条带明显增粗，从第1天一第 万方数据 四川医科大学硕士学位论文3天_第7天一第14天．÷第2l天一÷第28天的变化趋势为升高一升高_÷降 四川医科大学硕士学位论文 3天_第7天一第14天．÷第2l天一÷第28天的变化趋势为升高一升高_÷降 低一降低一升高一降低，与免疫组化结果相符。5．TUNEL染色检测细胞凋 亡：CO组脑组织海马CAl区有锥体细胞的凋亡，凋亡数量从第1天到第 28天呈现先增多，至第7天达最高峰后开始减少，第28天仍有凋亡；且 CO组各时间点的凋亡指数较空气对照组及空白对照组均显著增高，差异 有统计学意义(P0．01)；对照组大鼠海马区未见明显细胞凋亡。结论：1． 改良式腹腔注射CO法制备大鼠DEACMP模型，与人体发病的生理生化过 程类似，且操作过程简单安全、外界影响小、实验剂量易控制，是一种比 较符合DEACMP临床特点的动物模型。2．Morris水迷宫实验测试大鼠对空 间定位及方向感的记忆能力，其认知功能的变化可作为判断造模是否成功 的实验依据。3．CO中毒后HIF．10t可通过凋亡相关途径诱导神经细胞凋亡， 而HIF．1。【的增多可促进IGF．1的表达，在DEACMP的发病过程中IGF．1 可能发挥了抗凋亡及保护神经的作用。 关键词：急性CO中毒迟发性脑病；Morris水迷宫；凋亡通路； HIF．10t；IGF一1 万方数据 四川医科大学硕士学位论文Delayed 四川医科大学硕士学位论文 Delayed encephalopathy after acute CO poisoning rat hippocampus hypoxia--inducible factor-1 alpha and insulin-·like growth factor-1 (IGF-1)dynaIIIic expression Abstract：Objective：This experiment by measuring hypoxia—inducible factor-1 alpha(HIF-1 C1)and insulin-like growth factor-1(IGF-1)expression in rat model of DEACMP and preliminary discussion on HIF--l a and IGF--1 in DEACMP effects of the disease and its role in the pathogenesis and provide experimental basis for research of DEACMEMethods：1．1 5 6 healthy male SD rats(300～350