ptpn1促进食管癌细胞侵袭运动的分子机制研究细胞生物学专业论文.docxVIP

北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文 北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文 图表索弓 图表索引 图1．敲降PTPNl可抑制多个食管癌细胞系的侵袭运动 ．41 图2．敲降PTPNl对食管癌细胞系增殖的影响并不显著 ．41 图3．敲降PTPNl可在KYSEl50、KYSE510、KYSE30中降调EGFR表达水平及 Erkl／2的磷酸化水平 42 图4．EGFR．Erkl／2通路的活性改变对PTPNl不存在反馈调节 ．．43 图5．敲降EGFR可降低食管癌细胞系的侵袭运动能力 44 图6．敲降EGFR对食管癌细胞系增殖能力的影响并不显著 45 图7．抑制Erkl／2活性可降低食管癌细胞系的侵袭运动能力 46 图8．抑制Erkl／2活性对食管癌细胞系增殖能力的影响并不显著 ．47 图9．敲降PTPNl并回复EGFR表达水平可回复Erkl／2的活性 ．48 图10．敲降PTPNl并回复EGFR表达水平可回复食管癌细胞的侵袭运动能 力 49 图11．敲降PTPNl并回复EGFR表达水平不影响食管癌细胞的增殖 49 图12．敲降Spl可降低食管癌细胞系中EGFR表达水平 ．50 图13．敲降Spl可降低食管癌细胞系中EGFR的mRNA水平 ．51 图14．敲降PTPNl可降低食管癌细胞系中EGFR的mRNA水平 ．．52 图15．PTPNl不在转录后水平调控EGFR的蛋白表达 ．53 图16．敲降PTPNl在KYSE510中不影响Spl的蛋白表达水平 54 图17．PTPNl可促进食管癌细胞系中Spl的浆核易位 ．55 图18．原核表达GST及GST_PTPNl 55 图19．GST及GST-PTPNl在KYSEl50细胞裂解蛋白中进行GSTPull—down 56 图20．PTPNl和MYH9在食管癌细胞系中存在相互作用 58 图21．敲降MYH9可在KYSEl50、KYSE510、KYSE30中降调EGFR表达水平 59 图22．敲降MYH9可抑制多个食管癌细胞系的侵袭运动 6l 图23．在MYH9低表达细胞系KYSEl80中敲降PTPNl不能降调EGFR表达水 平 61 图24．稳定敲降MYH9的食管癌细胞系KYSE510 62 图25．敲降MYH9可降低食管癌细胞系中EGFR的mRNA水平 63 图26．敲降MYH9在KYSE510中不影响Spl的蛋白表达水平 63 图27．MYH9可促进食管癌细胞系中Spl的浆核易位 65 图28．Blebbistatin不影响食管癌细胞系的侵袭运动能力 66 图29．Blebbistatin不影响食管癌细胞系中EGFR的表达水平 66 4 万方数据 北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文 北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文 图表索弓 图30．MYH9的三个截短突变体在食管癌细胞中的表达情况 67 图31．针对MYH9的UTR区的siRNA在KYSEl50中对MYH9的敲降效果 67 图32．MYH9的尾部杆状结构域在MYH9调节EGFR蛋白表达中起到关键作用 ．68 图33．敲降PTPNl不影响MYH9的蛋白表达水平 69 图34．Phos．tag实验检测PTPNl对MYH9磷酸化状态的影响 ．70 图35．IP检测PTPNl对MYH9酪氨酸磷酸化的影响 ．．7l 图36．PTPNl通过酪氨酸磷酸酶活性调控EGFR表达水平 ．72 图37．PTPNl通过酪氨酸磷酸酶活性调控食管癌细胞的侵袭运动 73 图38．MYH9潜在的磷酸化位点 74 图39．MYH9一CDS3的Y1408非磷酸化突变体和磷酸化突变体在PTPNl调节EGFR 蛋白水平中的作用 76 图40．MYH9一CDS3的Y1408非磷酸化突变体在MYH9调节EGFR蛋白水平中的作 用 ．．76 图41．PTPNl促使MYH9的Y1408位点酪氨酸去磷酸化 77 图42．PTPNl直接作用于MYH9的Y1408位点