不同生理或应激状态小鼠血清中皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

2．6高温应激 2．6高温应激 14 2．7震荡应激 14 2．8慢性不可预知应激 14 2．9小鼠血清中皮质醇和皮质酮的测定 14 2．10皮质醇放免试剂盒对皮质酮交叉反应的测定 ．16 2．1l HPLC—MS法定性检N4,鼠血清中的糖皮质激素 16 2．11．1血清样品前处理 ．．16 2．1 1．2 HPLC．MS分析 ．16 2．12数据分析 ．16 3结果与分析 18 3．1 HPLC定性检N4,鼠血清中的皮质醇与皮质酮 ．1 8 3．2 HPLC．MS色谱图定性检Nd,鼠血清中的皮质醇与皮质酮 ．19 3．3 HPLC．MS扫描质谱图定性检Nd,鼠血清中的皮质醇和皮质酮 ．22 3．3验证皮质醇试剂盒中皮质酮的交叉反应率 24 3．4小鼠不同发情周期下皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性 24 3．5小鼠昼夜节律中皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性 25 3．6急性束缚应激小鼠血清中皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性 26 3。7慢性束缚应激模型下小鼠血清中皮质醇皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性 28 3．8慢性重复束缚应激和不可预知应激小鼠血清中下皮质醇和皮质酮的变化规律 29 3．9强迫游泳和热应激模型下小鼠血清中皮质醇皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性31 4讨论 ． ． 32 4．1皮质醇和皮质酮作为应激指标的优越性 32 4．2皮质醇和皮质酮在不同应激模型下的变化规律 33 4．3皮质醇和皮质酮在发情周期中的变化规律 33 4．4皮质醇和皮质酮在昼夜节律中的变化规律 34 5．结论 ． 36 参考文献 37 附录：图版及图版说明 。47 致谢 5l 作者简介以及发表论文 s2 万方数据 山东农业大学硕士学位论文中文摘要 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 众所周知，人类面对的压力(应激)越来越大，应激对机体损伤的研究也越来越 多，且实验动物多为小鼠。应激能够引起小鼠血清中激素的变化，调控小鼠应激反应 的糖皮质激素主要为皮质酮，但其血清中有无皮质醇以及皮质醇能否作为应激指标尚 无法确定。为此，研究了小鼠在发情周期、昼夜节律、急性和慢性应激(重复或不可 预知应激)模型下血清中皮质醇和皮质酮的变化规律及两者的相关性。 研究结果表明： (1)通过高效液相色谱和色谱．质谱联用分析，证实小鼠血清中含有皮质醇，其 保留时间及分子量均与皮质醇标准品一致。 (2)小鼠在发情周期、昼夜节律、急性应激(强迫游泳或热应激)、慢性束缚和 不可预知应激过程中，血清中的皮质醇和皮质酮变化趋势一致(r=0．6-0．85)，但两者 对应激源的反应速度不同。 (3)小鼠在发情期血清中的皮质醇和皮质酮水平最高，但与其他时期相比差异不 显著。 (4)在3：00、8：00、15：00、20：00检测小鼠血清中的糖皮质激素变化，发现皮质 醇和皮质酮水平在3：00．15：00期间变化不大，但在20：00时明显升高。 (5)慢性束缚应激23天过程中，糖皮质激素水平均在第一天应激结束时最高。 随着应激天数的增加，糖皮质激素水平逐渐降低，但皮质酮的变化更加明显。 (6)束缚应激、强迫游泳应激、42。C高温应激、震荡应激均能上调小鼠血清中的 皮质醇和皮质酮水平。 (7)急性强迫游泳和高温应激70min过程中，糖皮质激素水平均明显升高，但 是在应激3min时皮质醇水平已经接近最大值，皮质酮水平在应激后40min达到最大 值。对于急性剧烈应激源，皮质醇反应速度更快。 (8)皮质醇和皮质酮在慢性不可预知应激8天模型中均保持较高水平，而在慢性 适应性束缚应激模型后期皮质酮水平明显下降，皮质醇仍维持较高水平。皮质酮更能 反映适应性应激模型中应激水平的变化，而在急性应激模型中皮质醇则更能反映应激 水平的变化。 总之，研究结果表明：小鼠血清中含有皮质醇，且在不同生理和应激状态下，皮 万方数据 不同生理或应激状态小鼠血清中皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性质醇和皮质酮的变化趋势一致，都能作为应激的指标。但两者对不同应激源的反应也 不同生理或应激状态小鼠血清中皮质醇和皮质酮的变化规律及相关性 质醇和皮质酮的变化趋势一致，都能作为应激的指标。但两者对不同应激源的反应也 存在差异，皮质酮在慢性适应性应激模型中更能反映机体的适应过程，而皮质醇在急 性应激模型中反应更快。由此，本研究结果可为研究小鼠应激选取应激指标提供参考。 关键词：皮质醇；皮质酮；慢性束缚应激；慢性不可预知应激；急性应激 万方数据 山东农业大学硕士学位论文Dynamics 山东农业大学硕士学位论文 Dynamics and Correlation of Serum Cortisol and Corticosterone under Different Physiological or Stressful Condition