番茄叶片白化转绿控制基因wv的精细定位蔬菜学专业论文.docxVIP

华中农业大学学位论文独剖牲声明及使霜授衩书学健论文 华中农业大学学位论文独剖牲声明及使霜授衩书 学健论文 忍 如需傈密，解密时闷 年 月 日 是否保密 每 I]1IIllUII IIII IIIIIIIIilllllIIIIIII IIl 独创性声明 Y3052487 奉人声碉辑星交的论文是裁个人在导师指导下避行的研究二律及取褥豹砭究或 暴。尽裁惩知，除了文孛特裂加漤据注和致落戆避方辨，论文中不包含其穗久邑羟发 袭戴撰写过酌礤宠燕栗，也不包含为获褥华中农翌大学或其健教育执耨熬学位或蠢书 燕使用过熬材耩，撵导教帮对此逑行了审定。与羲一溺王俸黪黧志对本研究所髓翡任 簿贾蘸均已在论文孛截了蔫确的说鬻，并表示了榭意。 —》 1主 绣究塞签名：南艾帮 时闻：汐馆每参月／曩 学位论文使用授极书 零又竟坌了蘸攀孛衮建穴学蓑予溪存、蕊惩掌绞论交酌规定，誉≯掌塞潞须攘藻掌 校要黎提交掌佼论交戆露戴零静龟子版零；学校蛮衩缳毒囊交论文酌帮制版秘曦子版， 势撩供器霖捡索和藏楚鬟务，可敬象霸影印、蕊印藏扫撩等囊裁手黢镰襻、；三缓学位 谂支。本人藏意肇孛表鼓犬学可懿阐不同方式在不嚣潆体上发表、传播学位论文的全 蘩或警分癌客，为存在霪褥参俸关系的兄荣裔蔽雳户攫供文惑侍邃和交换黎务，鬻靖 零人曝留在婪链媒倦发袭论文昀权力。 注：镶密学位论文(霹涉及技术秘密、商监截寮葳孛请专剩簿潜在需要提交保密的论 文)在解密君适用于奉授权书。 学馘文孵鹳：高毒婧导爆签名：＼∥以 篓名鑫期：如％年易月／驽 签名誉黧：莎彰《年参月／謦 万方数据 番茄叶片白化转绿控制基因们，的精细定位目录 番茄叶片白化转绿控制基因们，的精细定位 目录 摘 要 ．．i Abstract ． ．iii 缩略词表 vi 1前言 ．．1 1．1课题的由来 1 1．2植物叶色突变体的研究进展 1 1．2．1植物叶色突变体的分类 ．．2 1．2．2构建植物叶色突变体的途径 ．．3 1．2．3植物叶色突变体的遗传方式研究 ．．6 1．2．4植物叶色突变发生的分子机制研究 ．．7 1．2．5植物叶色突变体的应用价值 。9 1．3番茄基因图位克隆技术的研究进展 ．．11 1．3．1番茄基因的图位克隆 11 1．3．2图位克隆技术的步骤 12 1．4本研究的研究目的及意义 ．．14 2材料与方法 1 5 2．1实验材料 ．．1 5 2．1．1番茄材料及种植 15 2．1．2质粒和菌株 15 2．1．3工具酶、试剂盒及试剂 15 2．1．4引物设计及序列测定 16 2．2实验方法 ．16 2．2．1突变体的表型鉴定及遗传分析 16 2．2．2叶片叶绿素及总类胡萝卜素含量的测定 16 2．2．3叶绿素荧光的相关参数测定 17 2．2．4叶片透射电子显微镜(TEM)观察与分析 17 2．2．5 F2代遗传分离群体的构建 1 7 2．2．6样品采集与DNA提取 ．．1 8 2．2．7分子标记的设计 1 8 2．2．8分子标记的扩增与筛选 19 万方数据 华中农业大学2016届硕士研究生学位论文2．2．9遗传连锁图谱的绘制 华中农业大学2016届硕士研究生学位论文 2．2．9遗传连锁图谱的绘制 19 2．2．1 0候选基因的预测及序列分析 ．．20 2．2．1 1 Q．RT-PCR检测 21 2．2．12 VIGS方法沉默候选基因 23 3结果与分析 27 3．1 wv突变体LAl526的表型鉴定 ．．27 3．2WV突变体LAl 526的遗传分析 ．．27 3．3 WV突变体LAl526的生理指标的分析 ．．29 3．3．1叶绿素及总类胡萝b素含量的测定与分析 29 3．3．2叶绿素荧光的相关参数测定与分析 30 3．3．3叶片透射电子显微镜(TEM)观察与分析 31 3．4分子标记的开发 ．．32 3．5目的基因w_l，的初定位 ．35 3．6目的基因wv的精细定位 36 3．7候选基因的筛选与分析 ．．36 3．8基因表达量的分析 。39 3．8．1叶绿素生物合成途径部分关键基因在LAl526中的表达分析 ．39 3．8．2候选区段的部分基因在LAl526中的表达分析 ．4l 3．9 VIGS沉默候选基因的结果及分析 42 4讨论． ． ．． ． ．． ． ．． ． ． ．． ．． ．． ． ．． ．． ． ．． ． ． ． ． ．zI!； 4．1 WV突变体不同于一般白化转绿突变体 ．45 4．2WV突变体白化转绿表型受隐性核基因控制 ．46 4．3白化转绿控制基因WV的基因定位 46 4．4白化转绿控制基因wv的克隆及突变表型产生的原因推测 48 4．5总结 ．49 参考文献 51 附 录 60 致i射 66 II 万方数据 番茄叶片白化转绿控制基因wv的精细定位摘要 番茄