雌激素经gpr30受体抑制阿片肽信号通路进而调控中枢性内脏痛敏的机制研究生理学专业论文.docxVIP

≥活炙远大海Shanghai ≥活炙远大海 Shanghai Jiao Tong University 博士学位论文 雌激素经GPR30受体抑制阿片肽信号通路进而调控中枢性内 脏痛敏的机制研究 Estrogen regulates central visceral hyperalgesia via GPR30 mediated inhibition of opioid signaling 博士生 焦英甫 学 号 0107109001 指导教师 戎伟芳教授 学科专业 生理学 研究方向 神经生理 申请学位级别 博士学位 培养单位 上海交通大学医学院 答辩日期 2013年5月20日 本课题得到国家自然科学面上项目(课题名称：雌激素经G蛋白偶联型受体 GPR30介导中枢性内脏高敏感机制研究，项目编号资助 万方数据 ||MYz．1BlP|Ui ||M Yz．1BlP|Uil06 1 3 上海交通大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立 进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意 识到本声明的法律结果由本人承担。 》 学位论文作者签名： 龟 荚 日期：刃J多年 6月 卜氧止， 日 万方数据 上海交通大学 上海交通大学 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许 论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制 手段保存和汇编本学位论文。 保密口，在一年解密后适用本授权书。 本学位论文属于 不保密do (请在以上方框内打“√”) 学位论文作者签名：垒炎 艚挪繇哦咖 日期：刃缪年6月斗日 日期：们日年月年日 万方数据 上海交通大学博士毕业论文摘要 上海交通大学博士毕业论文 摘要 雌激素对内脏痛觉感受存在着重要的调节作用，正常情况下女性体内外周合成雌 激素水平在不同生理阶段有着较大的波动，这可以直接导致在特定时期女性痛觉敏感 化的发生，而在中枢神经系统还存在着雌激素的局部合成，其功能、相应机制和存在 意义我们还知之甚少，需要进行更深入的研究。G蛋白偶联受体30(G．protein coupled receptor 30，GPR30)有别于经典雌激素核受体ERct矛rl ERl3，是位于细胞膜或细胞器 膜结构上的雌激素受体，可介导雌激素快速的非基因组效应。延髓头端腹内侧区 (Rostral ventromedial medulla，RVM)是中枢神经系统痛觉下行调控通路的重要组成 部分，是内源性阿片肽发挥镇痛功能的主要作用区域之一，是痛觉下行调控系统的最 后一个功能性核团，直接调控痛觉信息在脊髓后角的传递过程。 我们实验室前期工作已经证明RVM区域微量注射雌激素，对大鼠肠道痛觉有着 显著的易化作用，RVM核心区域中缝大核有GPR30的高表达，而ERct并l：l ERl31拘表 达则极少。这些结果提示雌激素可能是通过GPR30在RVM区域发挥对外周痛觉感 受的调控作用。本课题就是在前期工作的基础上，明确雌激素在RVM区域发挥作用 的受体机制，研究雌激素对内源性阿片肽镇痛系统的影响及其作用方式，最后，我们 在由环磷酰胺诱导慢性膀胱炎引发的肠道痛觉增敏病理模型(中枢性肠道痛敏模型) 大鼠上，探讨RVM区域GPR30信号通路在中枢性内脏痛敏发生中的作用。 主要实验结果如下： 一、RVM区域GPR30激活增强正常大鼠肠道痛敏 我们首先证实芳香化酶和GPR30在RVM区域神经元上存在阳性表达，而且在 ．部分神经元上有共表达；利用Western blot的方法确认GPR30是RVM区域主要存 在的雌激素受体类型；向大鼠RVM核心区域中缝大核微量注射GPR30特异性激动 剂G1，可显著增强正常大鼠肠道的痛觉反应，说明GPR30受体激活可以介导雌激 素在RVM区域对外周肠道痛敏的易化作用。 万方数据 上海交通大学博士毕业论文二、GPR30通过抑制“型阿片受体功能发挥痛觉易化作用 上海交通大学博士毕业论文 二、GPR30通过抑制“型阿片受体功能发挥痛觉易化作用 大鼠在体电生理实验研究发现，激活RVM区域中缝大核的GPR30几乎可以完 全拮抗外源性吗啡在该区域原本能够发挥的强大镇痛作用；而在离体延髓脑片上， 运用全细胞膜片钳记录的方法证明RVM区域¨型阿片受体介导的外向电流可以被 GPR30激活所抑制；进～步利用Western blot方法分析证实，GPR30激活是通过引 起R