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富含二硫键多肽蛋白质的化学合成新方法及其结构研究制药工程专业论文
合肥工业大学本论文经答辩委员会全体委员审查,确认符合合肥工业
合肥工业大学
本论文经答辩委员会全体委员审查,确认符合合肥工业 大学专业硕士学位论文质量要求。
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导师:
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万方数据
学位论文独创性声明本人郯重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行独立研究工作所
学位论文独创性声明
本人郯重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行独立研究工作所 取得的成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的内容外,论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得鱼£墨兰些盔堂 或其他教
育机构的学位或证书而使用过的榜料。对本文成果做出贡献的个人和集体,本人已
在论文中作了明确的说明,并表示谢意。 学位论文中表达的观点纯属作者本人观点,与合肥工业大学无关。
学位论文作者签名:痞迢旅 签名日期:劫嘭年。年月≯弓曰
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学位论文作者签名: 癌廷离 指导教师
签名日期:Ⅺ石年。年月哆曰 签名日期 _F;=j;,_=U槲M 乡日
论文作者毕业去向 工作单位:
联系电话: E—ma i l:
通讯地址: 邮政编码:
IV
万方数据
致谢本论文是在我的导师李宜明老师的悉心指导下完成的。从课题的提出到实验
致谢
本论文是在我的导师李宜明老师的悉心指导下完成的。从课题的提出到实验 的指导,直到最后论文的完成,李老师一直给我提出宝贵的意见和方法。李老师为 我提供了一个良好的科研环境和许多的科研机会,在这里感谢李老师对我的教诲 和培养。李老师有着深厚的科研理论基础,敏锐的科学眼光,严谨的治学作风,崇 高的科学追求,这些都是我永远学习的榜样。李老师谦逊的为人,朴实的生活态度, 都令我深深的敬佩。李老师不仅在科研工作上给了我莫大的帮助,也教会了我很多 为人处世之道,让我终身受益。在研究生期间,我所有的科研成绩都凝聚着李老师 的心血。在此,向李老师表达最崇高的敬意和最由衷的感谢。
感谢实验室陈晨晨师兄、许杨师兄和陈轶群师姐对我实验的帮助,陈师兄给与 的实验指导是我实验成功的关键,这三位师兄师姐在我刚进实验室时给了我很多 帮助。感谢何壶师兄对我实验的帮助。感谢许玲、郑勇、瞿达亮、文明同学这三年 与我共同努力和进步。感谢管超建、王业海师弟给予的支持与帮助。
感谢本科四年和研究生三年的所有授予我知识的老师们,你们让我有了学习的 能力和基础。
感谢我的父母和家人这几年来的理解与支持,你们永远是我前进的动力。
作者:李思践 2016年03月01日
V
万方数据
摘要近年来,多肽/蛋白质类药物由于具有靶向性强、药效高、毒副作用低,在体
摘要
近年来,多肽/蛋白质类药物由于具有靶向性强、药效高、毒副作用低,在体 内易于代谢等特点受到了制药领域的广泛关注。其中毒素多肽/蛋白是一类富含二 硫键的特殊功能多肽,主要是通过与细胞的特定受体蛋白(如通道蛋白)相互结合 进而发挥作用。这些受体蛋白通常都是重要的离子通道(膜蛋白),与细胞的增值 分化乃至人类各种疾病密切相关。由于毒素蛋白是自然界长期进化的产物,它们与 特定受体结合的特异性和效率远超过人工通过高通量筛选得到的小分子化合物。 基于此,毒素多肽/蛋白因具有良好的生物活性、极高的特异性而成为当前多肽药 物开发的研究热点。然而,由于毒素多肽/蛋白具有的特殊结构,使用传统的基因 重组表达方法难以大量获得具有正确结构、功能的该类蛋白质。近期兴起的蛋白质 化学合成法则弥补了传统方法中的这些问题,甚至在产量和效率上也都有明显优 势,蛋白质的化学合成目前已被认为是获得多肽和蛋白质的一种高效、有力的手段。 本文作者运用多肽酰肼连接技术结合的多肽/蛋白质固相合成策略,高效的合成了
一系列富含二硫键的毒素多肽(人源13防御素_4,¨.芋螺毒素SIIIA,以及海葵毒 素肽APETx2),并使用优化的条件成功将其复性,获得了具有正确空间结构的毒 素肽。然而,由于毒素多肽富含多对二硫键的特性,使其天然的复性效率较低并难 以分离纯化。为解决该问题,我们运用了Tian课题组发明的以二氨基二酸替代多 肽中二硫键的策略优化毒素多肽的合成及复性。具体来说,使用二氨基二酸可以减 少蛋白质中二硫键的错配进而明显提高合成及复性效率。使用该策略我们实现了 Hepcidin衍生物的化
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