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发酵工艺控制 21概述 一.发?体系的主要特征 一.发 ?体系的主要特征 1.细胞内部结构和代谢反应的复杂性2.细胞所处环境的复杂性3.过程系统状态的时变性 及参数的多样性和复杂性 影响因索多，有的因索未知，主要影响因素变化。 发酵水平主要取决于：生产菌种的特性；对工艺条件的控制（适合程度） 必须了解：菌体的生理代谢规律 工艺条件对发酵过程的影响及其控制 发酵过程的有关变化 规律 常规发?的工艺控制参数:温度、pH 常规发 ?的工艺控制参数: 温度、pH、搅拌转速与功率、空气流量、罐压、液位、补料速 率及补料量等。 过程的参数检测 过程的参数检测 1?直接状态参数 指能宜接反映发酵过程屮微牛物生理代谢状况的参数 包括：pH、DO、潮 CO2、尾气02、尾气CO2、黏度、基质和产物浓度、菌体浓度（0D、 DCW、湿重）等 参数的检测 在线检测 各种传感器：pH电极、DO电极、温度电极、液位电极、泡沫电极 尾气分析仪：测尾气02和C02含量 离线检测分光光度计、pH计、温度计、气相色谱（GC）、液相色谱（HPLC）、色丿滩JIJ（GC-MS） 等 2 ?间接状态参数 指利用直接状态参数计算求得的参数 包括?：比牛长速率U、摄氧率OUR、CO2释放率CER、W 商RQ、氧的得率系数YX/O、 氧体积传质系数KLa、基质比消耗速率QS、产物比主成速率Qp等 综合各种状态参数，获得代谢过程的各种信息，从而对发酵过程做出相应的调整和控制， 以获得最经济的发酵生产。 三.发酵过程的代谢调控和优化 1.代谢调控 以代谢（流）的调节最重要 调节酶的合成量，称为“粗调” 调节酶的催化活性，称为“细调” 工艺控制和过程优化的实质，就是利川各种方法和手段，使细胞的外部和内部环境最适合 基质和能量流向产物合成的生物途径，以获得最大的产量。 2.发酵过程优化的一般步骤 确定反映发酵过程的各种理化参数及其检测方法 研究这些参数的变化对发酵过程的影响及其机制，获得最佳的范围和最适的水平 建立数学模型定量描述个参数间随吋间的变化关系，为过程优化控制提供依据 通过计算机实施在线自动检测和控制，验证各种控制模型的可行性及其适用范围，实现发 酵过程的最优控制 2.2基质浓度对发酵的影响及其控制 先进的培养基组成是充分支持高产、稳产和经济的发酵过程的关键因素2—。 基质种类 -般包括：碳源、氮源和无机盐 前体 基质（原料）的质量 随产地和生产工艺而异须保证稳定的原料质量 尤其对有机碳源和氮源，经多次实验而定 基质浓度对发酵的影响 每一种基质都有-?个适立的浓度范围 基质浓度太低影响细胞的生长，不能保证足够量的菌体进行生产；延长发酵时间，降低生 产效率 基质浓度太高 菌体生长太旺盛，发酵液黏度很大，KLa很小，DO很低，影响发酵正常进 行；影响产物形成：如酵母利用葡萄糖进行培养，葡萄糖浓度太高， 将进行无氧发酵，产生乙醇，即为crabtree效应 又如葡萄糖氧化酶（GOD）发酵中：低浓度下：诱导作用高浓度下：分解代谢物阻遏作用 浓度由8%-6%,酶活提高26% 以鞍盐为氮源发酵：NH4+浓度过高，产生鞍离子效应，影响生长和合成 基质浓度的控制 初始培养基屮：基质浓度适宜（由实验而定） 发酵过程：通过补料操作来控制基质浓度 应根据菌体特性、工艺条件要求和发酵过程中代谢的具体情况，确定补料方式、速率和补料 O 2.3灭菌情况 灭菌温度高，时间长，对培养基破坏作用越大，影响菌体生长和产物合成。 如衙萄糖氧化酶（GOD）发酵中，灭菌温度比灭菌时间对产酚的影响更大。 一些易被高温破坏的成分如葡萄糖、前体等应该分消。 2.4种子质量的影响 种子的质和量对菌种生长的快慢和产物的介成存在重要的影响。 接种菌龄 菌龄指在种子罐中培养的菌休从开始培养至接种到下一级种子罐或发酵罐的这段培养时间 适宜菌龄以对数生长期的后期，即培养液中菌浓接近高峰时的种子较适宜 菌龄过小发酵前期牛长缓慢，整个发酵周期延长，产物开始形成的时间推迟 菌龄过大 菌量较多，生产能力下降，菌体过早自溶 最适的菌龄须多次实验，由发酵的结果而定 接种量 接种量 指接（移）种的种子液体积与培养液体积之比 适宜的接种量与菌体的特性（生长繁殖速度）及发酵工艺有关 常川接种量：5%~10% 抗牛素牛产：20%-25%，甚至更大 较大的接种量：可缩短生长达到高峰的时间，使产物合成提前，减少杂菌生长的机会 接种量太小牛长延迟期延长，发酵周期长，产物形成较迟，牛产效率降低 =1nj过大生长过快， =1 nj 过大 生长过快， 发酵液黏度增加，溶氧不足，影响产物合成 2.5温度对发酵的影响及其控制 菌体生长和产物合成都是在各种酶的催化下完成的，温度是保证酶活性的重要条件，因此 在发酵过程中维持稳定而合适的温度就显得十分重要。 一影响发酵温