同位素相对标记技术(iTRAQ)结合双向液相色谱与质谱联用技术应用于膝骨性关节炎血清差异蛋白的实验分析.pdfVIP

节炎各个时期的的潜在分子标志物。 方法： 收集膝关节骨性关节炎患者60例，参照 O、II、Ⅳ级的亚组， Kellgren—Lawrence(K-L)分级标准，分为K—L 每个亚组随机选取10例男性与10例女性。去除血清高丰度蛋白，进 行稳定同位素儿6、117、118的iTRAQ标记、反相色谱柱分离、质谱 检测及Swissport数据库检索；再利用生物信息学软件进行分析。对 的部分差异蛋白进行WesternBlot验证。 结果：通过对不同样品的iTRAQ肽段实验标记、Q-star质谱鉴 0级与K—L 定和MASCOT搜库，共筛选出有意义差异蛋白169个，K-L II Ⅳ级差异蛋白153个；K—L0级与K—LII级差异蛋白153个；K—L Blot验证的ADIPOQ、CRP 级与K-LIV级差异蛋白145个。Western 两个差异蛋白与实验iTRAQ定量蛋白组学分析检测的结果相符合。 结论：1．应用iTRAQ技术可筛选出与膝关节骨性关节炎发生发展 相关的多个差异蛋白。提示iTRAQ技术对于膝关节骨性关节炎蛋白质 组学血清生物标记物的研究有很好的应用前景。 2．hdiponectin可能是诊断膝关节骨性关节炎早期潜在的血清生 物标志物。同时指出脂类代谢紊乱可能才是膝骨性关节炎发病的根本 原因。 关键词：膝关节骨性关节炎，血清生物标志物，iTRAQ，ADIPOQ 创新点 1、采用iTRAQ技术结合液质联用技术动态分析膝骨性关节炎 发生过程中的血清蛋白质组的表达谱。 2、ADIPOQ可作为早期膝关节骨性关节炎的潜在分子标志物。 万方数据 SCREENⅢG EXPRESSEDSERIMPROTEⅢSⅣ OSTEOARTHRITIS OF RESEARCHBY LABELING ITRAQ COUPLEDⅥTH2DLC．MS／MS ABSTRACT Osteoarthritisisoneofthemostcommonoint mainclinical j disease，the manifestationsaretheslow ofoint developmentj adventofan oint even ofknee．Withthe j dysfunction，anddisability aging riseintheincidenceofthe hada society，increasingly disease，osteoarthritis influenceonhumanhealthandthe of ofits great survival，thestudy