cidea和cidec基因在肉鸡中的表达分析基础兽医学专业论文.docxVIP

目 目 录 2．2．2引物设计与合成 13 2．2．3 Total RNA的提取及质量测定 ．13 2．2．4 cDNA的合成 ．14 2．2．5 实时荧光定量PCR测定 ．．1 5 2．2．6数据统计 1 6 3 结果 ．16 3．1 CIDEa基因在AA肉鸡中的组织表达谱 ．16 3．2 CIDEc基因在AA肉鸡中的组织表达谱 ．16 z}讨论 ．1 7 4．1 CIDEa和CIDEc基因在从肉鸡中的表达谱相似 17 4．2 肉鸡CIDEa和CIDEc基因的表达谱与其他物种相似 17 5 小结 ．1 8 第三章CIDEa和CIDEc基因在肉鸡中的发育性表达分析 19 1 引言 19 2材料与方法 19 2．1 材料 l 9 2．1．1 试验动物 19 2．1．2试验耗材 19 2．1．3 主要试剂 1 9 2．1．4主要试剂的配制及保存 19 2．1．5主要仪器设备 20 2．2方法 20 2．2．1样品采集及保存 20 2．2．2血脂指标测定 21 2．2．3石蜡组织切片制作 23 2．2．4 引物设计与合成 23 2．2．5 Total RNA的提取及质量测定 ．23 2．2．6 cDNA的合成 ．．23 2．2．7实时荧光定量PCR测定 一23 2．2．8 数据统计 24 3 结果 ．24 3．1血脂指标比较结果 ．24 3．2脂肪组织石蜡切片比较结果 ．24 3．3 CIDEa基因在AA肉鸡中的发育性表达 ．25 3．4 CIDEc基因在从肉鸡中的发育性表达 ．26 4讨{念 ．27 5 小结 ．27 第四章CIDEa和CIDEc基因在高、低脂系肉鸡中的表达差异分析 28 万方数据 目 目 录 1引言 ．28 2材料与方法 28 2．1 材料 28 2．1．1 试验动物 28 2．1．2试验耗材 28 2．1．3主要试剂 28 2．1．4主要试剂的配制及保存 28 2．1．5主要仪器设备 28 2．2方法 29 2．2．1样品采集及保存 29 2．2．2血脂指标测定 29 2．2．3 石蜡组织切片制作 29 2．2．4引物设计与合成 29 2．2．5 Total RNA的提取及质量测定 ．29 2．2．6 cDNA的合成 29 2．2．7实时荧光定量PCR测定 一29 2．2．8 数据统计 29 3 结果 ．30 3．1血脂指标比较结果 ．30 3．2脂肪组织石蜡切片比较结果 ．30 3．3 CIDEa基因在两个品种肉鸡不同组织中的表达差异 ．31 3．4 CIDEc基因在两个品种肉鸡不同组织中的表达差异 ．32 4讨论 ．32 5 小结 ．33 第五章短期禁食对肉鸡CIDEa和CIDEc基因的表达影响 34 1 引言 ．34 2材料与方法 34 2．1 材料 34 2．2方法 34 2．2．1样品采集及保存 34 2．2．2 引物设计与合成 34 2．2．3 Total RNA的提取及质量测定 ．34 2．2．4 cDNA的合成 34 2．2．5实时荧光定量PCR测定 ．．35 2．2．6数据统计 35 3 结果 ．35 3．1 短期禁食对肉鸡CIDEa基因的表达影响 35 3．2短期禁食对肉鸡CIDEc基因的表达影响 35 万方数据 目 目 录 4讨{仑 ．36 5 小结 ．36 全文结论 一37 本研究的创新点 ．38 参考文献 ．39 致 谢 44 万方数据 摘要摘要 摘要 摘要 CIDE家族(诱导细胞凋亡DNA片段化因子45样效应因子)是一类脂滴相关 蛋白，参与调控脂类代谢的多个方面，其中，CIDEa和CIDEc与脂滴融合，脂肪 沉积，代谢性疾病有密切关联。目前关于肉鸡中CIDEa和CIDEc基因的表达分析 报道甚少，在本论文中，我们以高脂系从肉鸡和低脂系宁都三黄肉鸡为研究对 象，采用实时荧光定量PCR法分别检测CIDEa和CIDEc基因在第六周龄AA肉鸡 中的组织表达谱；在第二(2W)、四(4W)、六(6W)周龄从肉鸡中的发育性 表达规律；在第六周龄AA肉鸡和宁都三黄肉鸡中的品种间表达差异；在第六周龄 从肉鸡禁食24 h后的表达变化。取得的主要结果如下： 1、CIDEa和CIDEc基因在从肉鸡20个组织中普遍表达且表达谱相似，二者 在脂肪组织中有最高表达量，其次是肝脏、肾脏和卵巢。 2、CIDEa和CIDEc基因在AA肉鸡中的发育性表达相似，两个基因在五个组 织中的相对表达量随着肉鸡日龄的增大而升高，并在6W时有最高表达量。此外， 血清甘油三酯含量随着肉鸡日龄的增大而升高。4W的脂滴直径极显著大于2W， 而极显著小于6W。 3、CIDEa和CIDEc基因在高、低脂系肉鸡中的表达差异相似，两个基因在 AA肉鸡六个组织中的相对表达量均高于宁都三黄肉鸡的相应组织。此外，AA肉 鸡血清中的甘油三酯、总