单侧输尿管梗阻大鼠肾间质血小板反应蛋白1的表达及氯沙坦对其影响内科学专业论文.docxVIP

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单侧输尿管梗阻大鼠肾间质血小板反应蛋白1的表达及氯沙坦对其影响内科学专业论文

河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则, 承担相应的法律责任。 研究生签名:抽 徽领 碜年k参.F ,/警。岁∥妊P霄、∥≮磐r≮,篱√曩搬‰ 狳∥ 月/ 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 一躲”臌轹热矿 中文摘要单侧输尿管梗阻大鼠肾间质血小板反应蛋白1的表 中文摘要 单侧输尿管梗阻大鼠肾间质血小板反应蛋白1的表 达及氯沙坦对其影响 摘 要 目的:肾间质纤维化是各种慢性肾损害的共同特征,是 肾脏疾病进展至终末期的共同途径。大量研究表明,肾间质 纤维化进展与转化生长因子13 1(TGF.0 1)表达及活化增加 相关。血小板反应蛋白1(Thrombospondin.1,TSP.1)作为体 内关键的转化生长因子13 l(TGF.13 1)活化因子,通过激活 潜在的TGF.B 1促进肾小球硬化及肾间质纤维化,在肾脏疾 病中的作用越来越受到关注。体外系膜细胞研究发现,血管 紧张素II(Angiotensin II,AngII)诱导的TGF.B l的活化 也是通过TSP.1介导的,AnglI 1型受体阻滞剂可以抑制 AngII诱导的TSPl的分泌。本试验选用氯沙坦对实验性肾 间质纤维化模型进行干预,观察肾脏病理改变及检测TSP.1、 TGF—B 1、ColIII的表达,探讨TSP.1高表达与肾间质纤维 化关系,及氯沙坦对肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用及其 可能机制 方法:选择清洁级健康雄性SD大鼠45只,体重(200± 10)克,随机分为三组:假手术组(A组),输尿管结扎组(wo 组即B组),氯沙坦治疗组(C组),每组各15只。将各组大 鼠以水合氯醛(O.1ml/kg)腹腔注射麻醉后,行左侧耻骨上切 口,沿左肾下极寻找到左侧输尿管,在中上1/3处用4号线 上下结扎两处,然后从中剪断输尿管,以防逆行性感染,假 手术组除不结扎和剪断输尿管外,其他手术过程同前。术后 中文摘要各组大鼠均正常饮食。治疗组大鼠以氯沙坦50mg/kg/d制成 中文摘要 各组大鼠均正常饮食。治疗组大鼠以氯沙坦50mg/kg/d制成 2ml混悬液灌胃,1次/日:假手术组和UUO组大鼠用生理盐 水2ml/d灌胃,1次/日:三组均于术前一天开始灌胃至术后第 3天、第7天和第14天,分三批留取标本。输尿管结扎术后 分别于第3、7、14天处死,迅速取出左肾,按冠状位纵形 切开,取肾组织的1/2置于lO%福尔马林固定液固定,酒精 逐级脱水,二甲苯透明石蜡包埋,制成5um切片。光镜HE、 Masson染色观察肾脏病理变化。采用免疫组织化学染色测定 肾间质TSP。1、TGF.13 1、C01III的表达,结果应用图像分析 系统进行半定量分析。实验结果均以均数±标准差(;士S)表 示,各组间比较采用单因素方差分析,应用SPSS 10.0统计 分析软件对实验数据进行统计学处理,P0.05为有统计学意 义。 结果:1.病理改变:光镜下观察,HE及Masson染色A组 未见明显异常,肾小管上皮细胞排列整齐,细胞结构完整,小 管与小管之间问隙紧密,小管间质无炎性细胞浸润,小管基底 膜光滑、连续。HE染色B组术后3天肾小管扩张不明显,间 质中少量单核细胞与淋巴细胞浸润;B组7天可见肾小管明显 扩张,肾小管上皮细胞空泡变性、水肿、甚至坏死,肾间质 大量炎单核及淋巴细胞浸润,间质宽度增加;B组14天可见 弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩,小管基底膜不同程度断裂, 皮质及外髓萎缩的肾小管较多,间质中大量淋巴及单核细胞 浸润,可见大量纤维增生。C组各时间点改变均较同期B组改 变明显减轻。Masson染色可见B组术后3天开始出现肾小管扩 张,肾间质宽度增加,间质浸润细胞增多,胶原成分增加,此 后,病变逐渐加重。C组与B组平行相比肾小管间质病变程度 中文摘要明显减轻,肾间质相对面积明显减少(PO.05)。三组间比较 中文摘要 明显减轻,肾间质相对面积明显减少(PO.05)。三组间比较 均有统计学差异(PO.05)。2.免疫组织化学结果显示:TSP—l 在肾小管间质的表达:A组肾小管间质TSP.1极少量表达,B 组3天、7天、14天TSP.1的表达进行性增加,主要表达在肾 小管上皮细胞,C

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