高转移乳腺癌细胞系抗凋亡相关信号通路的研究临床医学专业论文.docxVIP

中文摘要摘要 中文摘要 摘要 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，发病率正呈逐年上升趋势，特别是乳腺 癌的转移严重危害患者的生命。迄今为止，有关乳腺癌转移的分子机制仍然是 研究的热点。抗凋亡活性的增加在肿瘤转移中发挥重要的作用。本研究以 MDA．MB．231和MCF．7两个高低转移的细胞系为模型，通过比较抑制剂处理前 后相关信号的变化，探讨了高转移乳腺癌细胞系中抗凋亡相关的信号通路，将 进一步揭示乳腺癌转移的分子机制，为乳腺癌的治疗提供药物作用靶点。 首先，应用流式细胞术检测这两个细胞系的凋亡情况。结果显示MCF．7的 凋亡率为0．94％，而MDA．MB．231‘的凋亡率为0．02％，明显低于MCF．7的凋亡 率，说明MDA．MB．231细胞系比MCF．7细胞系具有更明显的抗凋亡能力。 丝裂原活化蛋白激酶(mitogen．activated protein kinase，MAPK)家族信号途径 与肿瘤细胞的增殖、浸润和细胞凋亡等方面具有密切的关系。因此，我们探讨 了MAPK信号传导通路在MCF．7和MDA．MB．231细胞系中的变化和意义。免 疫印迹检测结果显示，P．ERK在MDA．MB．23 1细胞系中高表达，在MCF．7细 胞系中低表达，我们已经报道该P．ERK的增加与维持高转移乳腺癌细胞系的增 殖和迁移有关；P．JNK在两个细胞系中表达无明显差异；p-p38在MDA．MB．231 细胞系中低表达，在MCF．7细胞系中高表达，根据文献报道，我们推测p-p38 可能与高转移乳腺癌细胞系的抗凋亡能力有关。 因此，我们进一步研究了凋亡相关信号与p38信号传导途径的关系。应用 免疫印迹检测40 gmol／L浓度的SB203580(p38的特异抑制剂)处理30分钟后 细胞中P．MLCK、survivin和easpase．9蛋白的表达。结果显示P．p38被特异抑制 后，促凋亡因子caspase．9的表达也被抑制，而survivin和P．MLCK的表达上调， 提示这三个蛋白位于p38调控通路的下游，并且p38能通过调控它们的表达促 进细胞凋亡。 最后，我们通过MLCK的抑制剂ML-7研究了MLCK对凋亡的影响。免疫 印迹结果显示，在用15 rtmol／L浓度的ML．7作用细胞4小时后，细胞中MLCK 的表达受到抑制，流式细胞分析结果显示细胞凋亡率从0．02％上升至6．67％。结 果提示MLCK也可发挥抗细胞凋亡作用。 综上所述，高转移乳腺癌细胞系p38／MLCK，survivin，caspase．9信号通路 中文摘要的抑制使其具有了明显的抗凋亡的作用。 中文摘要 的抑制使其具有了明显的抗凋亡的作用。 关键词：乳腺癌凋亡MAPK p38 MLCK II AbstractAbstract Abstract Abstract Breast cancer is a cOnllTIOn malignant tUlllor in womgn and its morbility is getting higher year by year．The metastasis of breast cancer jeopardizes patients’ health tremendously and the mechanism of breast cancer cell metastasis is still a hot issue up to now．The increase of anti-apoptosis activity plays ail important role in tumor metastasis．We investigated the related anti—apoptosis signal pathways of breast cancer cell lines based on the cell models including MDA·-MB·-23 1 cell lines with lligh metastatic potential and MCF·7 cell lines with low metastatic potential． Moreover,We used inhibitors to study the related signal changes．This will make a further effort to reveal the molecular mechanism of metastasis to provide new drug targets on breast cancer． Firstly,we used FCM(flow cytometry)to detect apoptotic abili