酪氨酸激酶抑制剂ptk787抗急性髓系白血病作用的研究儿科学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 学位论文独创性声明本人呈交的学位论文系在导师指导下所取得的研究成果。除了文 学位论文独创性声明 本人呈交的学位论文系在导师指导下所取得的研究成果。除了文 中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，也不包含为获得广东医学院或其他教育机构的学位或 证书所使用过的材料。 作者签名： 如D占．6．，箩 学位论文知识产权声明 本人在就读研究生期间所完成的学位论文及其相关成果，知识产 权归属学校。本人在毕业离校前会将有关的研究资料和结果全部上交 导师，离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或 成果时，署名单位仍然为广东医学院。学校可以将学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复 制手段保存、汇编学位论文，可以公布(包括刊登)论文的全部或部 分内容。导师享有发表学位论文、申请成果和专利的权利。 注：保密的学位论文在解密后适用本声明。 作者签名：至盥导师签名：—娃日期：日期：立!皇金查：!主 矽乎、彭．／／． 酪氨酸激酶抑制剂PTK787 酪氨酸激酶抑制剂PTK787抗急性髓系白血病作用的研究 中文摘要 【目的】 1．观察受体酪氨酸激酶抑制剂(Receptor tyrosine kinase inhibitor， RTKI) PTK787对HL-60／SCID小鼠急性白血病模型在小鼠形态、行为、外周血变 化、肿瘤细胞浸润及生长等方面的影响，探讨PTK787治疗白血病的可能性。 2．观察急性髓系白血病模型小鼠骨髓微血管密度的变化，探讨骨髓微血管密度 改变在急性髓系白血病发病机制中的作用。 3．观察PTK787对骨髓微血管密度的影响，探讨PTK787抗急性髓系白血病的 作用机制。 【方法l 1．HL-60细胞培养将人类早幼粒细胞白血病细胞株(Human promyelocytic leukemia-60 cells，HL-60)细胞悬浮于含10％胎牛血清的RPMll640培养液 中，于37℃、5％C0：、饱和湿度的培养箱中培养，隔天换液，一周传代约2～ 3次。 2．动物模型分组6周龄严重联合免疫缺陷(Severe combined immunodeficieney mice， SCD)小鼠40只，雌性，于无特定病原体条件下饲养。按统计学方 法将SCID小鼠随即分为5组，每组均为8只，分别为：正常组(不建立模 型，不给予PTK787治疗)、患病组(建立模型，不给予PTK787治疗)、50mg／kg PTK787治疗组、100mg／kg PTK787治疗组、200mg／kg PTK787治疗组。 3．移植与给药 收集对数生长期HL．60细胞，患病组及治疗组均以腹腔注射方 式接种细胞1×107／鼠。建立模型后第l天，各治疗组小鼠通过灌胃方式按 照体重每天给予相应剂量的PTK787，正常组和患病组小鼠通过灌胃方式每 天给予生理盐水代替。 4．观察各组小鼠形态和行为的改变。 5．选取建模前4天、建模第7天、第14天、第2l天、第28天及第34天(处 死时间)为时间点，经过断尾采血法动态检测各组小鼠血常规、血涂片； 6．用流式细胞仪检测技术检测各组小鼠外周血白细胞表面CD33的阳性表达 率。 率。 7．检测患病组及治疗组小鼠腹腔肿瘤重量，用光学显微镜观测各组小鼠骨髓病 理切片。 8．采用SP免疫组化方法，用兔抗人血管假性血友病因子(von Wille-brand factor， vWF)多克隆抗体标记小鼠骨髓内皮细胞，检测各组小鼠骨髓微血 管密度。 9．相关数据使用SPSSll．5统计软件分析。 【结果】 1． 正常组小鼠形态行为无异常改变，患病组于建模第2223天出现患病症状， 各治疗组于建模第24-26天出现患病症状，各治疗组患病症状出现时间无明 显差异。 2．建模前4天、建模第7天及第14天，各组血常规结果无明显改变，建模第 2l天患病组及各治疗组外周血白细胞绝对值均升高，第28天、第34天明显 升高。时间及时间×组别的P值均0．05，时间因素以及时间和组别的交合 因素有统计学意义，说明外周血白细胞绝对值有随时间变化的趋势，时间因 素的作用随着组别的不同而不同；治疗组及患病组与正常组比较，各治疗组 和患病组比较，组别的P值o．05，其外周血白细胞绝对值的差异有统计学 意义；各治疗组之间比较，组别的P值o．05，差异无统计学意义。在第21 天、第28天，治疗组及患病组外周血白细胞绝对值高于正常组，p值均O．05， 差异有统计学意义；在第34天，外周血白细胞绝对值，治疗组及患病组高 于正常组，各治疗组低于患病组，尸值均O．05，差异有统计学意义；各剂量 组在各时间点的比较，P值均o．05，差异无统计学意义。 3．建模第21天患病组及各治