蛋白质多肽与dna相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散光谱及其分析应用研究-分析化学专业论文.docxVIP

¨¨¨n■■I ¨¨¨n■■I ¨Ⅱj¨m矩■■I J V J J J 3 第二{了蛋自质、多肽与DNA相互作用的研究方法及其分析应用 。6 2．1蛋白质、多肽与DNA相互作用的研究方法 6 2．2蛋白质、多肽和DNA的定量测定方法 。l 8 第二节共振瑞利散射及共振非线性散射技术及其分析应用 l 8 第四常本文的t要研究内容及意义 20 4．1本文的主要研究内容 。20 4．2研究意义 ．20 第二：章蛋白质与DNA相互作用的共振瑞利散射及共振I}线性散射光谱及其分析应用研究43 第一常木瓜蛋白酶与DNA相’瓯作用的RRS和RNLS光谱及其分析应用研究 43 1．引言 43 2．实验部分 43 3．结果与讨论 44 4．方法的选择性及分析应用 ．53 第一二节胰岛素与ctDNA的相互作用的RRS和RNLS光谱及其分析应用研究 57 1．j；I言 ． 57 2．实验部分 58 3．结果与讨论 59 4．方法的选择性及分析应用 71 第三节血红蛋白与sDNA相互作用的共振瑞利散射及荧光光谱研究 77 1．引言 77 2．实验部分 77 3．结果与讨论 78 4．方法的选择性及其分析应用 84 第二章多肽与DNA相互作用的共振瑞利散射光谱和共振非线性散射光谱及其分析应用研究 88 产知二 第一节多粘菌素B与DNA相互作用的RRS和RNLS光谱及其分析应用研究 ．．88 1．引言 ．88 2．实验部分 89 3．结果与讨论 90 4．方法的选择性及分析应用 99 第一二节盐酸万古霉素与DNA相互作用的RRS和RNLS光谱研究及其分析应用 ．105 1．弓I‘害i ．．1 05 2．实验部分 ．．．．．． ．105 3．结果与讨论 ．106 4方法的选择性及分析应用 4方法的选择性及分析应用 ll 3 第四章同多钨酸共振瑞利散射法和共振非线性散射光谱法测定多粘菌素B 。115 1．弓I言 ．1 l 5 2．实验部分 。115 2．1仪器与试剂 115 2．2实验方法 116 3．结果与讨论 。116 j●． 3．1 RRS光谱特征 116 《 3．2_二级散射和倍频散射光谱 l 17 一 3．3适宜的反应条件 l 17 3．4散射增强与PMB和核酸浓度的关系 119 3．5同多钨酸与多粘菌素B的相互作用 120 3．6散射增强的原因 122 4．方法的选择性及分析应用 ．．123 4．1共存物质的影响 123 4．2样品分析 l 24 致谢 ．129 博七期间相关研究成果 13l 称 称 利散射 线性散射 SOS Second Order Scattering 二级散射 FDS Frequency Double Scanedng 倍频散射 CD Circular dichroism 圆二色 AFM Atomic force microscopy 原子力显微镜 ctDNA Calf thymus DNA 小牛胸腺DNA hsDNA Herring Sperm DNA 鲱鱼精DNA sDNA Slamon DNA 鲑鱼精DNA Pap Papain 木瓜蛋白酶 ^ Hemoglobin 血红蛋白 0 PMB Polymyxin B 多粘菌素B VCM Vancomycin 万古霉素 ，辛A. 川 J ， 辛 共振瑞利散射(RRS)光谱(或共振光散射)和共振非线性散射(RNLS)是近年 共振瑞利散射(RRS)光谱(或共振光散射)和共振非线性散射(RNLS)是近年 来发展起来的一种新分析技术。由于它的简易性和高灵敏度引起了人们的关注， 在生化和药物分析、有机物和金属离子的测定以及纳米微粒的研究中得到越来越 多的应用。但是对于蛋白质和核酸等生物大分子，这种方法主要用于研究它们与 染料、药物等小分子以及纳米微粒的相互作用，尚很少用于蛋白质和核酸等生物 大分子之间相互作用的研究。鉴于RRS光谱对于分子间静电引力，疏水相互作用， 氢键作用等弱结合力的结合作用以及分子大小、形貌和构象变化较吸收光谱、荧 光光谱等常见的分子光谱分析法更为锐敏，这就为RRS光谱技术用于研究蛋白质、 核酸等生物大分子相互作用提供了有利条件，方法具有高灵敏度和简易性，它们 能够为生物大分子间的相互作用提供独特的新信息。而且从研究的生物大分子相 互作用和分子识别的体系，还可发现和筛选出对于核酸、蛋白质及多糖类物质的 高灵敏度和某些高选择性的分析方法。 本文的主要研究内容及结论如下： 1．蛋白质与DNA相互作用的RRS和RNLS光谱及其分析应用 (1)木瓜蛋白酶与DNA相互作用的RRS和RNLS光谱及其