雌激素活化巨噬细胞与子宫内膜异位症药物效应靶点的研究中药药理专业论文.docxVIP

Macrophage Macrophage activated by estradiol and its role as drug targets on intervening endometriosis 摘要 子宫内膜异位症(内异症)是指具有生长功能的子宫内膜组织出现 在子宫腔以外的部位，为妇科的常见病。临床症状主要表现为痛经，子 宫异常出血，不孕等。内异症的治疗，主要有手术治疗和药物(主要是 激素或激素调节剂)治疗，手术治疗和激素治疗由于适应症或副作用而 使其应用受到限制。中医药治疗内异症亦积累了一定的经验。本研究在 临床经验方的基础上，根据化瘀补肾、舒肝止痛的治则，拟定了包括肉 杜、三棱、莪术、夏枯草等八味中药的复方，研究了它对子宫内膜异位 症模型大鼠移植异位内膜的影响， 厂 ＼，(本文的第一部分研究了化瘀补肾方TCTS提取物对内异症模型大鼠 ＼ 的作用。发现(1)TCTSll．29／kg、22．59／kg能明显减小异位内膜移植物 重量(抑制率分别为50．9％、53．7％)。模型大鼠的内膜移植物生长成一 个或数个腔样结构。腔内面的上皮、固有膜，以及固有膜的基质细胞、 腺体样结构和厚度和成熟大鼠的子富相似，上皮细胞低柱状，生长良好。 固有膜内有大量梭形的基质细胞，可见子宫腺体样结构存在；7FCq’s 11．29／kg组移植物亦生长成腔样结构，但腔内表面的上皮成立方状，固 有膜厚度变薄，基质细胞大量减少，未见子宫腺体样结构存在。TCTS 22．59／kg组移植物的腔样结构上皮不完整覆盖，有的上皮虽然存在，已 成扁平上皮细胞。固有膜极薄，几乎不见基质细胞，未见子宫腺体样结 构存在。这些结果表明TCTS提取物能够抑制异位内膜组织的生长，使 其退化、缩小。体外实验亦表明TCTS能抑制子宫内膜基质细胞的增殖； (2)血清激素水平的检测表明模型组大鼠的雌激素水平显著高于假手 术组，同时FSH、LH水平均升高；给予TCTS提取物的大鼠血清雌激 Macrophage Macrophage activated by estradiol and its role as drug targets on intervening endometriosis 素水平比模型组明显下降，FSH、LH水平也下降，而孕激素的水平则 有所升高。这表明TCTS提取物抑制异位内膜组织生长与激素水平的变 化有关。(3)扫描电镜观察腹腔巨噬细胞的形态，正常组细胞贴壁生长 或呈圆形、椭圆形，表面有微绒毛，多呈细小短杆状；而模型组细胞， 表面微绒毛增多、密集，呈丝状或板状，可见较长的伪足，细胞表面比 正常组粗糙，有较多颗粒状隆起，皱褶增多，提示细胞处于激活状态。 给与TCTS提取物的细胞表面微绒毛比模型组减少，变短，表面趋于平 坦，提示巨噬细胞激活状态可被TCTS抑制。(4)以上的实验结果提示， 雌激素和巨噬细胞之间存在着内在联系，本文提出巨噬细胞与雌激素的 对话，可能是内异症发生发展过程中重要环节的假说。因此本研究第二 部分着重于雌激素对巨噬细胞的影Ijl自，试图探讨内异症的病理现象。 第二部分研究了雌二醇与腹腔巨噬细胞的关系。(1)利用扫描电 镜，观察了17 B一雌二醇对巨噬细胞表面的质膜及相关结构的影响，发 现给与1713．雌二醇100nM后，贴壁细胞增多，细胞胞体增大，形状不 很规则，表面微绒毛增多、增粗、密集，呈丝状或板状，甚至可见较长 的伪足，细胞表面有较多颗粒状隆起，皱褶增多。(2)17 B一雌二醇 100nM能增强巨噬细胞的吞噬功能，提高百分率为18．7％。(3)17 B- 雌二醇在0．001--1000nM的浓度能促进腹腔巨噬细胞释放NO，上升百 分率分别为56．1、78．1、76．4、79．0、89．5、92．1、65．7％。免疫组化的 结果经图像分析，表明1．100nM的17 0．雌二醇可诱导腹腔巨噬细胞中 iNOS的表达，细胞呈中等染色强度。(4)腹腔巨噬细胞在17 B一雌二醇 的诱导下，可产生和分泌TNF—a，并且利用信使分子的拮抗剂发现这 种作用与PTK、PKC、cGMP和钙离子等有关。(5)17 B一雌二醇各个 浓度列‘大鼠腹腔巨噬细胞产生IL-6含量均未见明显变化。(6)低浓度 的17 0一雌二醇(0。lnM)未弓[j起[Ca2+1i明显变化。100riM的17 B一雌二 Macrophage Macrophage activated by estradiol and its role as drug targets on intervening endometriosis 醇能使小鼠腹腔巨噬细胞的【ca”]i明显提i商(提高百分率为39．8％)。 17D．雌二醇诱导的腹腔巨噬细胞胞浆游离钙的升高是外钙内流和内钙 释放共同作用的结果，