蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较.PDFVIP

第37卷 第1期 食 品 科 学 技 术 学 报 Vol.37 No.1 36 2019年1月 Journal of Food Science and Technology Jan. 2019 doi:10.3969/ j.issn.2095鄄6002.2019.01.006 文章编号:2095鄄6002(2019)01鄄0036鄄05 引用格式:王兵兵,张永吉,李宪臻,等. 蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较[J]. 食品科学技术学报,2019,37(1): 36-40. WANG Bingbing,ZHANG Yongji,LI Xianzhen,et al. Comparison of immobilization methods of sucrose isomerase PalI with embedding and crosslinking[J]. Journal of Food Science and Technology,2019,37(1):36-40. 蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较 王兵兵,摇 张永吉,摇 李宪臻,摇 李摇 蓉* (大连工业大学生物工程学院,辽宁 大连摇 116034) 摘摇 要:采用海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法两种固定化方法,对来源于Klebsiella sp. LX3 的蔗 糖异构酶PalI 的稳定性和可重复利用性进行研究。 结果发现,海藻酸钠包埋法在海藻酸钠、CaCl2 质量分数为1郾5%、2%时,所得固定化酶的酶活最高,其最适反应温度为40 益,最适pH值为6;戊 二醛交联法在(NH ) SO 质量分数为90%,戊二醛体积分数为2郾5%时得到的固定酶酶活最高,交 4 2 4 联酶的最适反应温度为50 益,最适pH值为5。 通过对酶的稳定性比较,两种方法酶稳定性都优于 游离酶。 4 益保存20d后游离酶的酶活降低到30%,而戊二醛交联酶活性在95%以上,海藻酸钠 固定化酶残余酶活仍在60%左右。 戊二醛交联法固定酶活性优于海藻酸钠固定化酶,重复利用12 次戊二醛交联酶,其残余酶活仍为80%。 关键词:蔗糖异构酶PalI;海藻酸钠包埋;戊二醛交联; 固定化;酶活性 中图分类号:TS202郾3;Q814摇 摇 摇 摇 摇 文献标志码:A 摇 摇 异麦芽酮糖是蔗糖的一种同分异构体,其甜度 复使用的一类技术[6-7]。 固定化技术可提高酶的稳 [1] [2] 定性,且易于从体系中分离回收固定化酶,并可重复 为蔗糖的52% ,理化性质类似蔗糖 。 异麦芽酮 糖大量食用后在血液中释放单糖缓慢,有助于糖尿 实验降低应用成本[8-9]。 本研究拟分别采用较低成 病的防治以及阻止脂肪的过渡积累[3-4] ,因此在食 本的海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法对蔗糖异构酶 品工业上可以广泛替代蔗糖作为甜味剂。 来 自 PalI进行固定化,希望通过对这两种结果的比较,探 Klebsiella sp. LX3 的蔗糖异构酶PalI,能够催化蔗糖 索蔗糖异构酶固定化酶的实用性和可行性。 生成83%的异麦芽酮糖(琢鄄D鄄glucosylpyranosyl鄄1,6鄄 1摇 实验部分 D鄄fructofranose)和21%海藻酮糖(琢鄄D鄄glucosylpyr鄄 [5] anosyl鄄1,1鄄D鄄fructofranose) ,故可以作为一种良好 1郾1摇 实验材料 的异麦芽酮糖产生酶。 在异麦芽酮糖生产中,核心 蔗糖 异 构 酶 PalI (NCBI accession number 问题为产物的纯化分离,使用游离酶进行生产发酵 AAK82938)来源于 Klebsiella sp. LX3;大肠杆菌 会增加产物分离难度,蔗糖