多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究海洋生物学专业论文.docxVIP

多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞蛾体及移植的研究LDH 多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞蛾体及移植的研究 LDH (I．actale Dehydrogenase) 乳酸脱氢酶 HE(Hcmatoxylin-Eosin) 苏木精一伊红 PBS 0ho印hdte-bllffhed saline) 磷酸盐缓冲液 DOT 细胞分裂时间 DMSO(dimethyl sulfoxide) 二甲基亚砜 DM(Descemet) 后弹力层 8 独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果， 也不包含未获得 (潼；塑遗直墓他盂要挂型童跑的：奎拦豆窒2或其他教育机构的学位或证书使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：于爱铘签字日期：，哆年占月石日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并 向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人 授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后 适用本授权书) 学位论文作者签名：谴跚 导师签字：舂，j乙t、7己导师签字：气，I■t、心 签字日期：二◇年岳月6日 签字日期：加习年七月／6日 ／ 学位论文作者毕业后去向： 工作单位： 电话： 通讯地址： 邮编 多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究 多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究 多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究 摘要 目的：角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一，而 角膜内皮细胞(corneal endothelial cell，cEC)在维持角膜的正常生理功能 方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜后层的单层细胞，构成了后弹力层和房水 之间的物理屏障，通过离子“泵”功能调节角膜中离子浓度和水分，维持角膜的 半脱水状态，保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱， 常导致角膜水肿而使角膜部分甚至完全失去透明性。穿透性角膜移植术是目前取 代病变或受损角膜，恢复角膜透明性的主要治疗方法，但供体来源短缺、供体质 量的差异、部分排斥反应以及术后并发症等因素严重制约了角膜移植术的普及。 研制人工角膜内皮作为人体角膜的等效物是解决上述问题的最有效方法。随着组 织工程技术的兴起和发展，组织工程角膜成为诸多学者关注的研究热点。理想的 人工角膜内皮应与受体组织有良好的生物相容性，故支架材料的选择是重要的影 响因素。壳聚糖是一种聚阳离子多糖，其特有的理化性质己成为医药界及生物医 学领域的研究热点。研究证明，壳聚糖具有良好的生物相容性、生物可降解性、 降解可控性、抗眼组织纤维化以及抑菌性，在医用材料领域应用前景广阔。生物 可降解物质壳聚糖及其衍生物作为角膜细胞载体是一个新的研究方向。本研究旨 在探讨壳聚糖及其衍生物作为细胞活性载体进行角膜内皮损伤修复的应用前景。 方法：试验分三部分：一、角膜内皮细胞的体外培养：启动兔、狗、猫角膜 内皮细胞的原代及传代培养，摸索行之有效的角膜内皮细胞传代、保种方法，同 时为得到足量种子细胞，探讨了海洋活性物质对兔角膜内皮细胞的促增殖作用。 二、几种壳聚糖共混膜片的兔角膜内皮细胞相容性及其在兔前房组织相容性研究 的比较：63101、63102、63103三种不同壳聚糖共混膜片作为载体，进行体外角 膜内皮细胞培养，观察细胞相容性、贴附牢固度及膜片强度的观察；30只新西 兰白兔分为三组，分别于前房内植入三种膜片，进行裂隙灯、角膜厚度、角膜内 皮镜和组织学检查，比较三种共混膜片的前房相容性，另取3只新西兰白兔仅作 前房穿刺，作为对照，以期筛选出适合角膜内皮细胞贴附生长、有移植可行性、 有良好前房相容性的载体支架。三、兔角膜内皮细胞活性载片的培养及移植研究： 选择性能最佳的载体膜片作为载体支架，体外培养兔角膜内皮细胞达适宜密度。 多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究取15只新西兰白兔制作兔眼角膜内皮损伤模型，其中3只原位缝合作空白组， 多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究 取15只新西兰白兔制作兔眼角膜内皮损伤模型，其中3只原位缝合作空白组， 其余12只随机分为2组，分别在角膜后弹力层面植入载有兔角膜内皮细胞的壳 聚糖共混膜片和不载细胞的壳聚糖共混膜片，作为对照组和试