α7nachr激动剂对体外循环致肠屏障损伤的保护作用麻醉学专业论文.docxVIP

目 目 录 一、摘要 1 (一)中文摘要 1 (二)英文摘要 4 二、正文 7 (一)前言(一)目U舌 ／7 (二)材料和方法 ．8 (三)结果 12 (四)讨论 25 (五)结论 30 (六)参考文献 3 1 三、综述 ．36 (一)综述 ．36 (二)参考文献 ．．42 四、临床病报告 ．．45 五、附录 47 六、致谢 ．48 万方数据 大连医科大学硕士学位论文a7nAchR激动剂对体外循环致肠屏障损伤的保护作用 大连医科大学硕士学位论文 a7nAchR激动剂对体外循环致肠屏障损伤的保护作用 硕士生姓名：常畅 指导教师：孙莹杰教授 专业名称：麻醉学 摘要 目的： 通过观察a7nAchR激动剂(PHA568487)在胆碱能抗炎通路(Cholinergic Anti—inflammatory Pathway，CAP)中对体外循环(cardiopulmonary bypass，CPB)致大 鼠肠屏障损伤的影响，旨在探讨其肠屏障的保护作用及可能机制。 方法： 由沈阳军区总医院动物科研中心提供的成年雄性SD大鼠96只(重量450士509)， 随机(数字表法)分为4组，即假手术组(S组)、体外循环组(C组)、a7nAChR 激动剂(PHA568487)+CPB组(CP组)、a7nAChR激动剂(PHA568487)+a7nAhR阻断 剂(Methyllycaconitine，MLA)+CPB组(CPM组)。每组按4个采血时间再随机分成4 个亚组，分别为CPB开始前(TO)，停CPB即刻(T1)，CPB后2h(T2)，CPB后6h(T3)， 每个亚组再随机分配6只实验鼠。对禁食(6h)的大鼠腹腔内注射10％水合氯醛 300mg／kg实施麻醉。建立大鼠CPB模型，S组只置管不转流，c组置管后进行体外 循环，CP组在转流前30min给予PHA568487(O．8mg／kg)进行腹腔注射，CPM组给予 PHA568487(O．8mg／kg)进行腹腔注射，于30min后给予MLA(6mg／kg)进行腹腔注 射。分别于TO、T1、T2、T3各时点取处死大鼠的腔静脉血，经ELISA法测定血清 肠脂肪酸结合蛋白(I—FABP)、二胺氧化酶(DAO)、D．乳酸、白介素6(IL．6)、肿瘤 坏死因子(TNF．c【)含量的变化；同时采用Western-blot法检测肠上皮闭锁蛋白 (Occludin)和斑块蛋白(ZO．1)的表达；制作肠组织石蜡切片，并于光镜下观察其形 态病理学变化；取器官(MLN、肝、肾、肺)组织匀浆以及腔静脉血进行细菌培植， 万方数据 大连医科大学硕士学位论文并计算肠道细菌移位率。应用SPSSl9．0数据统计软件对实验结果进行分析，所有 大连医科大学硕士学位论文 并计算肠道细菌移位率。应用SPSSl9．0数据统计软件对实验结果进行分析，所有 计量资料按均值±标准差(T土SD)表示，组内比较采用重复测量方差分析，组间 比较采用单因素方差分析，计数资料比较应用贮检验，pO．05为差异有统计学意 义。 结果： 1、光镜结果显示，S组肠黏膜排列整齐，变化不明显；C和CPM组肠道黏膜损 伤严重，可见其变薄，绒毛萎缩、变性、脱落以及坏死，严重部分可见水肿甚至 出血；CP组肠道黏膜损伤明显减轻，仅见黏膜下层毛细血管轻度充血，黏膜上皮 轻度脱落以及腺体轻度扩张。 2、血清IL-6和TNF．a水平的变化：与S组相比，C组、CP组和CPM组在T1～T3 三个时点的IL-6币DTNF-a水平水平均明显升高，其差异有统计学意义(pO．05)。与C 组相比， CP组与CPM组在T1～T3三个时点的IL．6和TNF-a水平均明显降低，差异 有统计学意义◇o．05)。CPM坌It在T1～T3三个时点和cP组相比其水平有升高，差异 有统计学意义(口0．05)。 3、血清D哥L酸、DAO和I．FABP水平的变化：与S组相比，C组、CP组和CPM组 在TI～T3_U_=个时点的血清D一乳酸、DAO和I．FABP水平均显著升高，差异有统计学 意义◇o．05)。与c组相比，CP组、CPM组在T1～T3三个时点的三种指标水平均明 显降低，差异有统计学意义∞0．05)。cPM组在T1～T3Z个时点与CP组相比较，三 种指标水平均有升高，差异有统计学意义(矽o．05)。 4、肠上皮Occludin蛋白和ZO．1蛋白表达的变化：与S组相比，CP组、C组、CPM 组在TI～T3Z个时点的两蛋白表达均降低．差异有统计学意义(p0．05)。与C组相 比，CP组和CPM组在Tl～T3三个时点的两蛋白表达均有所增加，差异有统计学意义 ◇o．05)。CPM组在T1～T3三个时点与CP组相比较，两种蛋白表达均有降低，差异 有统计学意义(p0．05)。 5、远隔脏器细菌移位率：与S