大孔树脂纯化知母总皂苷工艺研究.PDF

2012 第十四卷 第一期 ★Vol.14 No.1 大孔树脂纯化知母总皂苷的工艺研究＊ □胡洋叶 王玉蓉＊＊ 韩振蕴 （北京中医药大学中药学院 北京 100102） 摘 要：目的：考察大孔树脂纯化知母总皂苷的工艺。方法：以知母总皂苷含量为指标，采用正 交试验确定乙醇浓度、乙醇用量和提取时间；考察大孔树脂型号、上样浓度、吸附流速、上样体积、 除杂溶媒、洗脱溶剂浓度及其体积对纯化结果的影响。结果：选取工艺为 12 倍量50% 乙醇提取，每 次2.0 h ，提取2 次，提取液过AB-8 型大孔吸附树脂柱（树脂径高比为1∶8），吸附流速1 mL ·min-1 ，6BV 0.2 mol ·L-1 NaOH 溶液洗涤，再用蒸馏水洗至流出液呈中性，3BV 80% 乙醇洗脱。结论：该工艺稳定可 行，可用于知母总皂苷的提取与纯化。 关键词：知母总皂苷 纯化 AB-8 型大孔树脂 doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2012.01.017 知母为百合科 Liliacea 植物知母Anemarrhena 越广泛应用。利用大孔吸附树脂纯化知母提取物，可 [5] asphodeloides Bge． 的干燥根茎，具有清热泻火、生津 保留其有效成分，减少剂量。苏子仁等 采用D101 大 润燥的功效，主要含有甾体皂苷和知母多糖等有效 孔树脂柱，用水、0.5%NaOH 溶液、20% 乙醇洗涤，用 [1~2] 95% 乙醇洗脱，不仅过程繁琐、耗时长，且以菝葜皂苷 成分 。近年来的药理研究证实，知母皂苷及苷元 + + 元为指标时易存在水解不完全、稳定性差等问题，不 有抑制Na -K ATP 酶活性、抗血小板聚集等药理活 [3] [6] 性 。动物试验及临床研究证明，知母皂苷的制剂可 适合大规模生产；李庆国等 采用AB-8 大孔吸附树 使甲状腺激素型和糖皮质激素型“阴虚”动物升高的 脂考察了对知母皂苷的吸附动力学特性，发现动态 β 受体恢复正常，纠正由于 β 受体升高引起的一系 吸附曲线不呈S 型曲线，且存在泄漏现象，因此提出 列心血管系统的病理状态，可以抑制衰老、老年性痴 通过吸附柱的串联解决吸附漏液现象，以提高吸附 [4] 率，但该研究中未涉及洗脱参数。本实验以知母总皂 呆和脑功能减退 ，但由于知母含糖量高，提取物具 有易吸潮、黏度大等特点，因此，用于中试生产的工 苷为指标，筛选了5 种型号的树脂，发现AB-8 大孔 艺研究至今尚未有突破性进展。 吸附树脂吸附解吸效果最好，通过实验确定了适于 大孔吸附树脂是一类新型的非离子型高分子化 中试生产的吸附、洗脱工艺参数。 合物，在中药有效成分的提取分离纯化方面被越来 一、仪器与试药 752 紫外可见分光光度计（上海现科分光仪器有 收稿日期：2011-03-04 限公司），知母皂苷A-Ⅲ对照品（购自上海融禾医药 修回日期：2011-05-17 ＊ 国家科委重大专项课题（2009ZX09103）：参知健脑方治疗血管性痴呆的研究与开发，负责人：韩振蕴。 ＊＊ 通讯作者：王玉蓉，教授，博士生导师，主要研究方向：中药新剂型与新技术，E-mail ：yurong.wang@163.com 。 1232 〔World Sci