半夏泻心汤及其类方对胃运动影响的作用机理及物质基础分析中西医结合基础专业论文.docxVIP

中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 本课题为国家ee西医结合基础重点学科2II工程资助项目(NO 2001—004)， 本研究主要探讨半夏泻心汤、生姜泻心汤和甘草泻心汤对胃运动影响的作用机 理和部分物质基础。 理论研究 通过对类方研究、胃运动研究以及ee药复方物质基础近年来的研究概况进 行回顾性总结，我们提出了中药复方类方研究策略。中药复方类方研究策略的 内容包括：中药复方类方差异点的研究和中药复方类方内在固有规律的研究。 中药复方类方研究策略的目的：为中药复方的配伍规律和物质基础提供实验依 据；为重组高效中药复方提供新思路。本研究以半夏泻心汤、生姜泻心汤和甘 草泻心汤为研究对象，以胃运动为研究切入点，对三方胃运动影响的作用机理 和物质基础进行较为深入的探讨，以期为中药复方类方研究提供有意义的科研 思路和实验依据。 实验研究分三部分 第一部分 目的：本部分实验主要观察半夏泻心汤、生姜泻心汤、甘草泻心汤对在体 大鼠胃排空作用的影响并对其作用机理进行了深入探讨。 结果：I)对胃排空的影响：半夏泻心汤对胃排空有促进作用；生姜泻心汤 对胃排空为抑制作用；甘草泻心汤对胃排空有促进趋势。2)对胃肠澈素的影响： 半夏泻心汤可以使大鼠血中V【P水平下降、P物质水平下降、ss水平升高。生 姜泻心汤可以使MTL水平升高，GAS水平升高，ss水平升高。甘草泻心汤可以 使MTL水平升高，GAS水平升高。对三个泻心汤组大鼠胃内色素相对残留率和 血中激素水平进行相关分析，结果发现半夏泻心汤促进胃排空可能与其降低大 鼠血中VIP水平有关：生姜泻心汤对胃排空的抑制作用可能和其升高大鼠血ee VIP和ss的水平有关，甘草泻心汤促进胃排空的趋势可能与大鼠血中MTL水平 升高有关．3)对平滑肌收缩调控抑制蛋白及其基因的影响： Caiponin和 caide smon为平滑肌收缩的两个调控抑制蛋白。本实验显示caIponin和 caIde smon对胃肠道平滑肌有不同的调节作用，可能介导了三泻心汤对胃运动 的调节作用。 三泻心汤组大鼠胃窦平滑肌calponin和caIdesmon表达量均有 下调趋势。免疫组化结果显示：caiponin表达量为生姜泻心汤组甘草泻心汤 组半夏泻心汤组。与对照组相比，半夏泻心汤组calponin表达下调明显。 caldemon表达量为甘草泻心汤组生姜泻心汤组半夏泻心汤组。与对照组相比， 三泻心汤组Caidemon表达量下调均较为显著。RT-PCR结果显示：与对照组相 比，三泻心汤组caiponin mRNA和C8．Idesmon mRNA表达量也有所下调，下调结 2 2 半夏泻心汤及其类方对胃运动影响的作用机理及物质基础研究 果与免疫组化结果大致相同。 第二部分 目的：本部分实验观察三方含药血清对胃窦平滑肌细胞收缩功能的影响， 在细胞水平深入探讨三方对胃运动影响的作用机理。 结果：1)对胃窦平滑肌细胞收缩功能的影响：三泻心汤含药血清可以引起 大鼠胃窦平滑肌细胞不同程度的收缩，结果显示，三泻心汤含药血清以5％终 浓度，作用时间5分钟为佳。从促进收缩的程度来讲，半夏泻心汤组生姜泻心 汤组甘草泻心汤组。2)对冒窦平滑肌细胞内钙商子的影响：三泻心汤含药血 清对胃窦平滑肌细胞内钙离子的荧光峰值影响的结果显示，与对照组相比，半 夏泻心汤含药血清使胃窦平滑肌细胞内钙离子的荧光峰值明显增加，其他两方 合药血清对细胞内钙离子的荧光峰值影响不明显。三方组问比较，细胞内钙离 子荧光峰值大小顺序为半夏泻心汤组生姜泻心汤组甘草泻心汤组。连续扫描 结果显示，在不同时间段，半夏泻心汤和生姜泻心汤含药血清均可以使大鼠胃 窦平滑肌细胞内的荧光值增加，提示二泻心汤可以增加平滑肌细胞内的钙离子 浓度。而组问比较显示，甘草泻心汤含药血清对胃窦平滑肌细胞内的荧光值改 变不明显，但组内比较，有升高的趋势。3)对胃窦平滑肌细胞收缩调控抑制蛋 白基因的影响：三泻心汤含药血清也均可以使胃窦平滑肌细胞calponin mRNA 和caldesmon mRiqA的表达下调，结果与整体实验相似，提示三泻心汤含药血 清对胃窦平滑肌细胞的收缩作用，与其直接改变calpoMn mRNA和caldesmon mRNA的表达量有关。 第三部分 目的：观察给药后一定时问大鼠血中三泻心汤小檗碱、黄芩甙和甘草次酸 的含量变化及三种成分与胃运动的关系；观察三泻心汤中三种有效成分小檗碱、 黄芩甙和甘草次酸不同配比组成的有效成分组方对胃窦平滑肌细胞收缩功能的 影响，在细胞水平探讨三泻心汤部分有效成分配伍规律。 结果：1)大鼠血中三种成分台量：小檗碱含量大小依次为生姜泻心汤组 半夏泻心汤组甘草泻心汤组，但差别无统计学意义；黄芩甙含量大小依次为生 姜泻心汤组半夏泻心汤组甘草泻心汤组，且生姜泻心汤组大鼠