foxc1在肾透明细胞癌中的表达及对细胞增殖和周期的影响外科学泌尿外科专业论文.docxVIP

解放军医学院硕士学位论文FoXCl在肾透明细胞癌中的表达及 解放军医学院硕士学位论文 FoXCl在肾透明细胞癌中的表达及 对细胞增殖和周期的影响 中文摘要 目的：FOXCl为FOX蛋白超家族的成员之一，过去对于FOXCl的功能的研究主 要集中于胚胎发育与基因遗传方面，而近期的研究发现FOXCl在肿瘤发生和发展 的过程中起到了重要作用。目前，研究已证实FOXCl与乳腺癌、肺癌和肝癌等肿 瘤的恶性程度密切相关，但在肾透明细胞癌(ceRCC)中的表达情况及其对肿瘤发 生发展的作用及相关机制尚无明确研究报道。本课题通过对肾透明细胞癌及其癌 旁组织中FOXCl的表达进行检测分析，并通过在肾癌细胞系中敲低及过表达 FOXCl基因，观测其增殖变化，以了解FOXCl在肾透明细胞癌的发生发展中的 作用，并为，临床诊断治疗肾透明细胞癌提供靶标的基础实验依据。 方法：1．收集我院60例肾透明细胞癌患者术后肿瘤及对应瘤旁冰冻标本。进行实 时定量PCR(RT-PCR)实验、蛋白印迹(western—blot)实验及免疫组织化学染色 实验(mC)，分别在核酸及蛋白水平检测FOXCl的表达量，并对这60例病例-临 床资料进行分析。2．通过RT-PCR及western-blot实验，检测正常肾小管上皮细胞 株HK2，肾透明细胞癌细胞株769．P，786．O，OSRC．2中FOXCl的表达量。3．通 过RNA干扰技术，转染FOXCl特异性干扰siRNA，下调细胞系786一O，769一P的 FOXCl表达量，行平板克隆，MTS及细胞周期实验，观察分析其增殖变化。4．通 过构建pLV-EGFP[1]一FOXCl过表达质粒，包装病毒，感染786．O，769一P细胞系， 使其过表达FOXCl基因，通过平板克隆，MTS及流式细胞技术检测细胞周期实 验，观察分析其增殖变化。 结果：在肾透明细胞癌患者肿瘤冰冻标本中mRNA水平比相对应的瘤旁冰冻标本 中FOXCl表达有显著下降(P0．05)。FOXCl在mRNA水平不同性别、年龄、 及TNM分期等分析均无统计学意义(P0．05)，2．在肾透明细胞癌细胞系中成功 转染siRNA．FOXCl，FOXCl表达下调后平板克隆实验及MTS实验显示细胞增值 增高(P0．05)，细胞周期实验显示低表达FOXCl组G1期细胞比例降低，S期 细胞比例升高(PO．05)。细胞大量进入S期从而促进细胞增殖。3．成功构建 pLV-EGFP—FOXCl质粒，并在肾透明细胞系中构建稳定过表达FOXCl细胞株。过 表达FOXCl的细胞株在平板克隆实验及MTS实验中增值率降低(P0．05)，细 1 万方数据 解放军医学院硕士学位论文胞周期测定实验显示质粒组Gl期细胞比例升高，细胞较少进入S期，使S期细胞 解放军医学院硕士学位论文 胞周期测定实验显示质粒组Gl期细胞比例升高，细胞较少进入S期，使S期细胞 比例均降低(P0．05)，而G2期比例无显著差异(P0．05)。细胞被阻滞于G1／S 期而抑制细胞增殖。 结论：FOXCl在ccRCC中表达降低，与肿瘤的发生发展及恶性潜能相关；FOXCI 对细胞增殖及细胞周期变化有较大影响，提示可能在ccRCC的发生发展过程中发 挥抑癌基因的作用。 【关键词】FOXCl：肾透明细胞癌：细胞增殖：细胞周期 2 万方数据 解放军医学院硕士学位论文Expression 解放军医学院硕士学位论文 Expression Of FoXCl in Clear Cell Renal Cell Carcinoma and its Influence on Cell Proliferation and Cell Cycle Abstract objective：FOXC 1，a transcription factor in superfamily of FOX，exerts various functions in many types of cancers．However,its role is not clear on clear cell renal cell carcinoma[2]which is the most common subtype in renal cell carcinoma．This study is to investigate the expression of FOXC 1 on the tissue of ccRCC and adjacent normal tissues，the specific role of FOXC 1 on cell proliferation and cell cycle，to establishe a basis for further study on the mechan