脊髓损伤动物模型的建立及自体血小板在脊髓损伤修复中的作用外科学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 脊髓损伤动物模型的建立及白体血小板在脊髓损伤修复中的作用 脊髓损伤动物模型的建立及白体血小板在脊髓损伤修复中 的作用 摘要 【背景和目的】脊髓损伤是一种创伤性疾病，一旦发生将给病人带来终身痛 苦，病入将会丧失运动和感觉功能，瘫痪在床，丧失劳动能力，生活不能自理给 家庭社会带来极大的负担。脊髓损伤主要是由于运动、高空坠落、交通事故、工 伤、塌方等原因造成的。随着社会的现代化进展，这些活动的增加，脊髓损伤的 发生率也因此会上升，所以目前世界上许多国家正在投入大量的人力物力进行脊 髓修复研究。主要的研究方向体现在以下几个方面：一是进行细胞移植、脊髓移 植研究，如将雪旺氏细胞、少突胶质细胞、少突树突细胞、嗅鞘细胞、干细胞、 胎儿的脊髓移植等来促进脊髓再生，修复脊髓损伤；二是基因水平上的研究，主 要是抑制死亡基因的表达从而抑制死亡受体及死亡配体的产生及结合来达到抑 制神经细胞的凋亡从而保护脊髓细胞免于死亡；三是减少脊髓损伤区的疤痕形 成，促进神经再生；四是利用生化制剂如神经生长因子及激素来保护和促进神经 再生；五是利用促进神经再生的药物来促进神经再生；六是利用大网膜移植等来 恢复脊髓的血运或重建脊髓的血运，七是联合利用以上各种方法来保护神经细胞 不受损伤，促进受损神经细胞修复及再生。尽管以上各种方法都有一定的作用， 但要完全修复受损脊髓还有很长的一段路要走，所以有必要继续对脊髓损伤的修 复进行不懈的研究。目前国外有人利用血小板来修复动物骨折、跟腱断裂已获得 成功，试验者认为血小板在受到刺激时会释放出一系列的生长因子，促进受损组 织再生和修复，而血小板的这种作用是非特异性的，此外血小板源生长因子对神 经元的存活，耳蜗听神经细胞的分化等都有很重要的作用。众所周知血小板富含 髓磷脂、ADP、生长因子等物质，当血小板被激活时，就会将它们释放出来。而 神经损伤后的修复正需要这些东西。本实验是在他人实验的基础上，根据已有试 验结果而提出的，由于血小板可以用来修复受损组织，利用血小板可不可以修复 受损的脊髓呢?，本实验的设计就是为了验证血小板是否可以促进脊髓损伤的修 复。如果血小板有此功能，那将会给临床上的患者带来很大的福音，因为血小板 取材较容易，可以用自体血小板来修复脊髓损伤，而且使用也很方便。 【方法】用新西兰大白兔60只，雌雄各一半，称重后随机分为4组，一组为 脊髓损伤组后用自体血小板治疗组，标为A组：一组为脊髓损伤后用自体血浆 治疗组，标为B组；一组为脊髓损伤后未治疗组，标为C组；一组为椎板切开 后脊髓未损伤，也末治疗的对照组，标为D组。每只兔子都抽取耳静脉血5ml， 用冷冻离心机在2209 用冷冻离心机在2209离心力作用下离心20分钟，取上清液，将上清液在4809 的离心力作用下离心20分钟，下面的沉淀为血小板，用lmml的生理盐水稀释 后备用；上清液为血浆，取Imini备用，将血小板及血浆放入4 6C冰箱冷冻备用， 将兔子用安定及氯氨酮复合麻醉后在无菌条件下于L3～4打开椎板，暴露脊髓， 用改良Allen氏撞击法致伤脊髓， A组兔子将血小板注入受损处脊髓的硬脊膜 外间隙，B组兔子用自体血浆注入受损处脊髓的硬脊膜外间隙，c组脊髓损伤后 不治疗，D组兔子打开椎板不损伤脊髓，每只兔子都关闭伤口，术后用20u青霉 素／只／天，消炎3天，每一组又分别在术后第l、3、17、24天进行观察脊髓 诱发电位(SSEP)，于术后第3、7、14天处死试验动物取出标本进行病理切片 及检测MBP(髓鞘结构蛋白1，MBP及SSEP的结果进行统计分析(用SPSSll．5 统计软件)。 【结果】MBP及SSEP的试验结果采用SPSSll．5统计软件分析。肌 电图应用单因素分析法One--Way AN0vA进行检验，检验水准设o【= O．05，肌电图(SSEP)的潜伏期(P)及峰电位(F)ANOVA的检验结果分别如 下：(1)潜伏期(P)的检验结果：F=2．14，P=0．127，组间差异无统计学意义； 从数值上看是未治疗组的潜伏期平均数最长，血小板治疗组及血浆治疗组的潜伏 期居中，椎板切开组最短。(2)峰电位(F)的检验结果：F=4．202，P=0．019， 组问差异有统计学意义，从数值上看是未治疗组的峰电位平均数最小，血浆治疗 组的峰电位居中，血小板治疗组及椎板切开组的峰电位最高。髓鞘结构蛋白 (MBP)应用单因素分析法One--WayANOVA检验，发现组间方差不齐，所以 组间差异应用Game--Howell进行检验，结果如下：检验水准：a=0．05，血小板 治疗组MBP平均数值大于血浆治疗组的MBP平均数值，P=0．0250．05．，差异 有统计学意义，血小板治疗组MBP平均数值大于未治疗组的MBP平均数值， P=0．022