妊娠相关血清蛋白a对内皮细胞功能的影响及氟伐他汀的干预研究内科学心血管专业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 摘要 目的观察妊娠相关血清蛋白．A(PAPP．A)在体外对内皮细胞 功能的影响，同时探讨氟伐他汀对PAPP．A诱导内皮细胞功能改变的 干预作用。 方法体外培养人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)，将对数生长期的 HI_NEC随机分为四组。分别给予不同浓度的PAPP．A(O ng／ml、 50ng／ml、100 ng／ml、200 ng／m1)刺激，于Oh、12 h、24 h和48 h收 集上清液和细胞，用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)的浓度，用 免疫组化法测定内皮素．1(ET．1)的表达。取对数生长期的HUVEC 随机分为五组，实验组分别予不同浓度的氟伐他汀(0 mmol／L、10。7 mmol／L、1 0 1姗ol／L、1 0-Smmol／L)干预20min后，加入200 ng／ml PAPP—A，12h后收集上清液和细胞，用硝酸还原酶法测定NO的浓度， 用免疫组化法测定ET-1的表达。 结果 在50ng／mlPAPP．A、1 00ng／mlPAPP．A及200ng／mlPAPP．A 干预组，12h、24h和48h上清湖O浓度均低于同组Oh NO的浓度，差 异具有统计学意义，P0．05。在12h、24h和48h，随着PAPP．A浓度的 增加，上清液NO的浓度逐渐降低，与对照组相比具有统计学意义， P0．05。在200ng／mlPAPP．A干预组，细胞ET-1的表达呈时间依赖性增 加；在12h、24h和48h，随着PAPP．A浓度的增加，ET-1的表达呈浓度 依赖性增加，与对照组相比具有统计学意义，P0．05。 实验第二步，随着氟伐他汀干预浓度增加，上清液NO的浓度逐 渐升高，与单纯PAPP．A干预组比较具有统计学意义，P0．05。在单 纯PAPP．A干预组，细胞ET．1的表达明显增加，与对照组比较具有统 计学差异，P0．05。随着氟伐他汀干预浓度增加，ET-1的表达逐渐减 低，均低于单纯PAPP-A干预组，P0．05，但仍高于正常对照组，P0．05。 结论PAPP．A在体外能诱导内皮细胞NO分泌减少，ET-1表达上 调，且具有浓度依赖性，无明显时间依赖性。氟伐他汀对PAPP．A诱 导的内皮细胞功能损害可能有保护作用，且具有浓度依赖性。 关键词妊娠相关血清蛋白．A，内皮细胞，氟伐他汀，一氧化氮， 内皮素．1 硕士学位论文 硕士学位论文 英文摘要 ABSTRACT objective：To investigate whether pregnancy—associated plasma protein—A had effects on the injury of vascular endothelial cells(VEC) and whether Statins could protect vascular endothelial cells from the injury that made by the Pregnancy—associated Plasma Protein-A． Method：HUvECS cell line．derived from human umbilicalvein endothelial cells，were cultured in vitro with pregnancy—associated plasma protein-A with concentrations of 0 ng／ml，25 ng／ml，50 ng／ml，1 00 ng／ml for 0，1 2，24，48 hours，respectively．Then 1 0～mmol／L，1 0～mmol／L， 1 0-5 mmol／L fluvastatin were added first into vascular endothelial cells (ⅦC)for 20minutes．And secondly vascular endothelial ceils(VEC) were cultured with pregnancy-associated plasma protein-A with concentrations of 200 ng／rnl for 1 2 hours．At the same time the mean optical density(MOD)at each concentration was determined in order to calculate the influence．NO levels and ET levels were determined by using spectrophotometer and immunehistory． Resu