食品中铁含量的测定 (2).pptVIP

食品中铁含量的测定 铁含量测定方法 食品中铁的测定有火焰原子吸收光谱法,二硫腙比色法(邻菲啰啉,磺基水杨酸,硫氰酸盐比色法等）两种国家标准方法。我们采用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。 实验目的 1了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法 。 2掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法 3了解721型分光光度计的构造和使用方法 实验原理 在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物 与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。 因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。 为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量 条件。通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度， 干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。对显色剂 用量和测量波长的选择是该实验的内容 根据朗伯－比耳定律：A=εbc。 当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与 该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标 准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即食品中铁的含量。 邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据：邻二氮菲亦称邻菲咯啉?（简写phen），是光度法测定铁的优良试剂。在pH=2～9的范围内，邻二氮菲?与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。?? 此配合物的lgK稳?=?21.3，摩尔吸光系数ε510?=?1.1×104?L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：? 2?Fe3+?+?2?NH2OH·HCl?→?2Fe2+?+?N2?+?H2O?+?4H+?+?2Cl-? 测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜，用邻二氮菲可测定试样中铁的总量 实验仪器及药品 1.主要仪器与设备：721型分光光度计，马福炉，电热炉，容量瓶，移液管，普通天平，电子天平，比色管，电子天平，烧杯，移液管，比色皿，漏斗及漏斗架等。 2.试剂： （1）400ug/ml铁标准溶液：准确称取0.864g 分析纯NH4Fe(SO4)2?12H2O，置于烧杯中用30ml 2mol/L盐酸溶解后移入500ml容量瓶中，定容，摇匀。 （2）20ug/ml 铁标准溶液：由400ug/ml的铁标准溶液溶液准确稀释20倍而成。 （3） 0.2%邻二氮杂菲溶液：准确称取邻二氮杂菲1g，置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。 （4）10%盐酸羟胺溶液：称取盐酸羟胺固体50g，置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。 （5）1mol/L NaAC 溶液：称取NaAC固体68g，置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。 、 (6) 0.4 mol/L NaOH溶液：称取8.0g NaOH固体于试剂瓶中，加500 ml水溶解。 (7) 2mol/l HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸10ml于50ml容量瓶中，定容，摇匀。 (8) 1：1 HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸25ml于50ml容量瓶中，定容，摇匀。 （9）8mol/LNaOH溶液：称取160.0gNaOH固体溶于烧杯中，冷却后移入500mL容量瓶，定容，摇匀。 3.实验用品：鸡蛋黄。 实验步骤 样品处理 取熟鸡蛋黄称重16.5g置于蒸发皿中，捣碎，在通风处中小火加热，直至不再冒烟为止，然后将其放入马福炉内灰化（约一天一夜），去处冷却后，加入1：1的盐酸，并用小火加热使其全部溶解，然后过滤，移入50ml的容量瓶中，定容，摇匀，备用。 标准溶液配制? 1)?10μg·mL-1铁标准溶液配制????准确称取0.8634g硫酸铁铵NH4Fe(SO4)2·12H2O于100mL烧杯中，加60mL?3mol·L-1?H2SO4溶液，溶解后定容至1L，摇匀，得100μg·mL-1储备液(可由实验室提供)。用时吸取10.00mL稀释至100mL，得10μg·mL-1工作液。? 2)?系列标准溶液配制????取6个50mL容量瓶，分别加入铁标准溶液0.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL，然后加入1mL盐酸羟胺，2.00mL邻二氮菲，5mLNaAc溶液(为什么?)，每加入一种试剂都应初步混匀。用去离子水定容至刻度，充分摇匀，放置10min 。? 用吸量管取蛋黄溶液5ml置于50ml容量瓶中，加入1.0m 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加