东方拟无枝酸菌产聚乳酸降解酶和蛋白酶的研究微生物学专业论文.docxVIP

山东大学硕士学位论文缩写词表 山东大学硕士学位论文 缩写词表 AA amino acid氨基酸 AAA N—succinyl．Ala—Ala．Ala．p—nitroanilide kK吒 N-succinyl．Ala—Ala．Pr舻Phe．p．nitroanilide GGF N-succinyl·-Gly·-Gly·Phe-·P—nitroanilide GGG N-succinyl—Gly—Gly—Gly—p-nitroanilide HPLC High Performance Liquid Chromatography高效液相 k1)a Killo—Dalton予道尔顿 PAGE Polyacrylamide Gel Electrophoresis聚焉烯酸胺凝胶电泳 PBS poly．(butylene succinate)聚丁烯琥珀酸酯 PC乙 poly(一caprolactone) 聚己内酯 P船 poly(b-hydroxybutyrate)聚羟基丁酸酯 PLA polylactide acid聚乳酸 SDS Sodium Dodecyl Sulfate十二烷基硫酸钠 TLC thin-layer chromatography薄板层析 4 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。 对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方 式标明。本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 土疰 日 期：2垒旦压：垒f2 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借阅：本人授权山东大学可以将本学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名： 王蒸 导师签 虫东大学露士学毽论文摘要 虫东大学露士学毽论文 摘要 随着世界社会经济的发展，由石油等化石资源合成的高分子化合物制品的 大量生产、消费及遗弃等所引起的环保问题目趋严重，人们的环境保护意识曰趋 强烈。为了解决合成树脂和纤维不易被环境分解的问题，生物可降解高分子材料 逐渐成为研究的热点，其中聚乳酸被认为是～种最有前途的可降解高分子化合 物。与聚乳酸的合成相比，有关其生物降解的研究却相对滞后。PLA在自然界中 降解缓慢，已发现的降解微生物及所产降解酶数量釉类有限，且具有一定的特殊 性，这在一定程度上制约丁PLA生物降解机理的阐明，也限制了可控降解材料的 开发推广和应用。 本论文的主要工作是从自然环境中筛选得到了～株可以高效降解聚乳酸的 菌株。经过菌种鉴定，确定此菌株为放线菌属的东方拟无枝酸菌。研究了不同的 诱导物对子该菌产聚乳酸降解酶活性的影响，得出明胶为最佳的诱导物之～。由 于明胶也是该藤产生蛋自酶的诱导物，在诱导培养65小时后，其蛋白酶产生量 达到最高值，发酵液中蛋白酶活最高可达29，000叽。虽然蛋白酶酶活和聚乳 酸降解酶酶活最高峰出现的时间稍有不同，但两者活性均随诱导时间而增加，说 明蛋白酶活性和聚乳酸降解酶活性的产生具有～定的相关性；同时，对发酵粗酶 液的基本酶学性质进行了研究，诱导酶系表现出的蛋白酶活性和聚乳酸降解酶活 性，均在碱性pH范围内具有较高的活性和稳定性，从丽显示聚乳酸降解活性与 蛋白酶活性闻存在某种内在的联系。 进一步对菌株的胞外酶系进行了分析，纯化得到了五个蛋囱酶组分，其中三 个具有聚乳酸降解活性，分别为PLAase I PLAase II和PLAaseIII。对粗酶液的 以及聚乳酸降解酶组分的底物特异性研究表明，并不是所有的蛋白酶都具有聚乳 酸降解酶活性。但从一株菌株当中可以同时分离出三种聚乳酸降解酶组分，说明 东方拟无枝酸菌中所产生的聚乳酸降解酶在酶性质上可能存在某种内在联系。探 讨了聚乳酸酶解产物的分析方法，从而为进一步研究蒙乳酸的酶学降解枫翻提供 分析技术平台。 关键词：东方拟无枝酸菌 聚乳酸降解酶蛋白酶产物分孝厅 山东大学硕士学位论文ABSTRACT 山东大学硕士学位论文 ABSTRACT Wi也the development of the world economy,the environmental condition has been deteriorating by the widespread use ofpetroleum-derived products，and concerns about