食品中产毒霉菌的分离与鉴定..ppt

一、实验目的 一、实验目的 1 、学习并掌握食品中常见产毒霉菌分离纯化的主要方法和技术;进一步熟练掌握食品检样的处理及梯度稀释技术； 2 、掌握产毒霉菌的形态学鉴定技术，了解菌丝形态及其产孢结构在霉菌分类鉴定中的重要性； 二、实验原理 三、实验器材 样品：小麦、玉米、黄小米、面粉、米粉、面包、饼干、花生等 察氏培养基、高盐察氏培养基,PDA培养基,无菌生理盐水、乳酸石炭酸棉蓝染色液 培养皿、试管、锥形瓶、镊子、玻璃涂棒、显微镜、盖玻片、载玻片、解剖针、酒精灯、接种钩、接种针 四、实验步骤 五、实验结果 (5)渗出物 有的菌种常常在菌落表面出现的带颜色的似液体物即为渗出物，记录其色调和分泌的量。 (6)其他 是否出现除霉味以外的其他特殊的气味。 * * 实验五 食品中产毒霉菌的分离与鉴定 二、实验原理 三、实验器材 四、实验步骤 五、实验结果 产毒霉菌极易在含糖的饼干、面包、粮食等类食品上生长，与食品卫生关系密切的霉菌大部分属于半知菌亚门中的曲霉属、青霉属和镰刀菌属。其产生的毒素主要有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、杂色曲霉素、烟曲霉毒素、单端孢霉烯化合物、玉米赤霉烯酮、伏马菌素以及展青霉素、桔青霉素、黄绿青霉素等。 霉菌产毒需要一定的条件，影响霉菌产毒的条件主要是食品基质中的水分、环境中的温度和湿度及空气的流通情况 。 曲霉属：黄曲霉、赭曲霉、杂色曲霉、烟曲霉、构巢曲霉和寄生曲霉等； 青霉属：岛青霉、桔青霉、黄绿青霉、扩张青霉、圆弧青霉、皱折青霉和荨麻青霉等； 镰刀菌属：犁孢镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、三线镰刀菌、雪腐镰刀菌、粉红镰刀菌、禾谷镰刀菌等； 其它菌属 ：有绿色木霉、漆斑菌属、黑色葡萄状穗霉等。 本属的产毒霉菌主要包括黄曲霉、寄生曲霉、杂色曲霉、 构巢曲霉和棕曲霉。这些霉菌的代谢产物为黄曲霉毒素、杂色曲霉素和棕曲霉毒素。 1、营养菌丝体 由具横隔的分枝菌丝构成；无色或有明亮的颜色,一部分埋伏型,一部分气生型。 曲霉属 2、产孢结构 分生孢子梗大都无横隔,光滑、粗糙或有麻点。梗的顶端膨大形成棍棒形、椭圆形、半球形或球形的顶囊,在顶囊上生出一层或二层小梗,双层时下面一层为梗基, 每个梗基上再着生两个或几个小梗。从每个小梗的顶端相继生出一串分生孢子； 由顶囊、 小梗以及分生孢子链构成一个头状体的结构,称为分生孢子头。分生孢子头有各种不同颜色和形状 ,如球形、放射形、棍棒形或直柱形等。 曲霉属 黄曲霉 构巢曲霉 黄曲霉 黄曲霉 黑曲霉 烟曲霉 青霉属 本属产毒霉菌,主要包括黄绿青霉、桔青霉、圆弧青霉、展开青霉、纯绿青霉、红青霉、产紫青霉、冰岛青霉和皱褶青霉等。 这些霉菌的代谢产物为黄绿青霉素、桔青霉素、圆弧偶氮酸、展青霉素、红青霉素、黄天精、 环氯素和皱褶青霉素。 1、营养菌丝体 呈无色、淡色或鲜明的颜色,具横隔, 或为埋伏型或部分埋伏型部分气生型 。气生菌丝密毡状、松絮状或部分结成菌丝索。 2、产孢结构 分生孢子梗由埋伏型或气生型菌丝生出,稍垂直于该菌丝(除个别种外,不象曲霉那样生有足细胞),单独直立或作某种程度的集合及至密集为一定的菌丝束,具横隔, 光滑或粗糙。其先端生有扫帚状的分枝轮,称为帚状枝。帚状枝是由单轮或两次到多次分枝系统构成,对称或不对称,最后一级分枝即产生孢子的细胞,称为小梗。 青霉菌 镰刀菌属 本属的产毒霉菌主要包括禾谷镰刀菌、串珠镰刀菌、雪腐镰刀菌、 三线镰刀菌、梨孢镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌和木贼镰刀菌等。 这些霉菌的代谢产物为单端孢霉烯族化合物、玉米赤霉烯酮和丁烯酸内酯等。 1、营养菌丝体 气生菌丝发达高 0.5～1.0cm或较低为 0.3～0.5cm，或更低为0.1～0.2cm；稀疏的气生菌丝，甚至完全无气生菌丝而由基质菌丝直接生出黏孢层，内含大量的分生孢子。 2、产孢结构 可产生大、小两种分生孢子。 小型分生孢子通常假头状着生,较少为链状着生,或者假头状和链状着生兼有。 小型分生孢子生于分枝或不分枝的分生子梗 上,形状多样,卵形、梨形、椭圆形、长椭圆形、纺锤形、披针形、腊肠形、柱形、锥形、逗点形、圆形等。1～2(3)隔, 通常小型分生孢子的量较大型分生孢子为多。 大型分生孢子产生在菌丝的短小爪状突起上或产生在分生孢子座上,或产生在粘孢团中;大型分生孢子形态多样,镰刀形、线形、纺锤形、披针形、柱形、腊肠形、蠕虫形、鳗鱼形,弯曲、直或近于直。顶端细胞多种形态,短啄形、锥形、钩形、线形、柱形,逐渐变窄细或突然收缩。 蓝色犁头霉 镰刀菌 链格孢霉菌 瓶霉菌 （一）产毒霉菌的分离 按GB/T4789.15-20