格林巴利综合征患者脑脊液差异蛋白质组学研究生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

山东大学硕士学位论文符 山东大学硕士学位论文 符 号 说 明(按在正文中出现先后次序) 5 山东大学硕士学位论文DTT 山东大学硕士学位论文 DTT propanesul fonate) Tri S 二硫苏糖醇(dithiothreit01) Gly 三羟甲基氨基甲烷(tris hydroxymethyl aminomethane) BSA 甘氨酸(glycine) TCA 牛血清白蛋白(bovine serum albumin) I从 三氯乙酸(trichloroacetic acid) EDTA 碘乙酰胺(iodoacetamide) DDW 乙二胺四乙酸二钠(disodium ethylenediamine tetraacetate) PMF 双蒸水(di-distilled water) ELISA 肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprint) TTR 酶联免疫吸附实验(enzyme linked immuno-absorbent assay) ApoE 甲状腺激素结合蛋白或称甲状腺激素转运蛋白(Transthyret in) Hpt 载脂蛋白E(apol ipoprotein E) HSP-70 触珠蛋白或称结合珠蛋白(Haptoglobin) ApoA—。IV 热休克蛋白一70(hot shock protein) NFL 载脂蛋白A—IV(apol ipoprotein A—IV) 神经丝蛋白(Nurorofi lament) 6 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明 的法律责任由本人承担。 论文作者签名：每丕磷。 El 期：2罡：上：监 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论 文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：卒螅导师签名：鞲日 期：矿g-．r．2 山东大学硕士学位论文格林一巴利综合征患者脑脊液差异蛋白质组学研究 山东大学硕士学位论文 格林一巴利综合征患者脑脊液差异蛋白质组学研究 硕士研究生： 杨银荣 导 师：刘师莲教授 专 业： 生物医化学与分子生物学 摘 要 格林一巴利综合征(Guillain-Barre’Syndrome，GBS)又称急性炎性脱髓鞘 性多神经病(acute Inflammatory demyelinating p01yneuropathy，AIDP)， 是累及周围神经(peripheral nervous system)和神经根髓鞘的，以急性、对称 地进行性、获得性、炎性为特征的自身免疫性疾病。其病理特征为周围神经血管 周围的淋巴细胞和巨噬细胞的浸润，为炎症伴髓鞘脱失即炎性脱髓鞘。是目前急 性软瘫的最常见病因。在发展中国家发病率比较高，多为急性发病，预后较差n3。 即使得到加强监护，仍然有3％一7％的死亡率，此外，大约7％一15％的病人会 留有神经学上的后遗症，如：面瘫、下肢无力伴垂足、手无力和肌萎缩、植物神 经障碍等瞳1。 GBS的广泛被接受的诊断标准仍然是描述性的，尚缺乏明确的定义和确切的 诊断标志物，其病因和免疫学发病机制迄今未明。大量的实验b刮证明，GBS患者 脑脊液(cerebrospinal fluid CSF)中存在蛋白质的异常表达，这为我们研究 GBS提供了一个独特的窗口。到目前为止，国内对GBS脑脊液的研究尚缺乏系统 的研究，多停留在经典实验生物学研究水平。本研究将蛋白质组学技术体系应用 于GBS脑脊液的研究，通过优化双向电泳分离技术、质谱鉴定技术、搜索大量数 据库，检测到GBS患者与正常人脑脊液的差异蛋白，并对某些明显的差异蛋白进 行后期的免疫学验证，为疾病的早期诊断、有效药物靶点的发现、疾病发病机制 的探讨提供实验和理论依据。 目的：建立GBS患者与正常人脑脊液比较蛋白质组学的技术研究体系，寻找 并鉴定GBS患者脑脊液特异蛋白，为其发病机制提供线索，为临床诊断和治疗提 山东大学硕士学位论文 山东大学硕士学位论文 供依据。 方法：分别取GBS疾病组和对照组的新鲜脑脊液，冰丙酮沉淀法提取总蛋白， 进行第一向等电聚焦电泳(IEF)和第二向十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS)分离蛋白质组，