传统乳制品中产γ氨基丁酸乳酸菌的筛选鉴定及发酵条件优化食品科学专业论文.docxVIP

摘 摘 要 采用薄层层析法和高效液相色谱法，从分离自传统发酵乳制品中的180株乳酸 菌中筛选得到9株具有生成丫．氨基丁酸能力的菌株，分别为WHll．1(2．4779]L)、 M1043(1．4059／L)、WZ20—2(1．1329／L)、Mll-3(1．115 eeL)、WZl-2(1．0069／L)、 S1一l(0．5819／L)、M5一l·1(O．310 g／L)、Mll-2-1(0．225 g几)和Mll·l(O．211 gnA。 经传统的形态学、生理生化特性及化学特性等分类方法，确定WHll．1、 M1 0-4．3、M1．2、M1 1-3和WZ20．2等5株菌为乳酸乳球菌乳酸亚种亿．1actis subsp Lactis)， S1．1、M5．1一l和M11-2．1等3株为植物乳杆菌(上．plantarum)，M11．1为 短乳杆菌(上．salivarius)。 在传统鉴定的基础上，利用分子生物学的方法对菌株WHll．1和M10-4．3进行了 16S rDNA基因序列的扩增与测序，并将结果与乳酸球菌标准菌株的16S rRNA／DNA 基因序列作同源性分析， 建立系统发育树。结果表明，菌株WHll．1与标准菌株三． 1actis subsp Lactis NCD0604的同源性为99．1％；M10_4．3与标准菌株L．1actis subsp Lactis NCD0604的同源性为100％。结合生理生化等传统鉴定结果及系统发育树，可 将菌株WHl 1．1和M10-4．3均判定为L．1actis subsp Lactis。 试验探讨了培养条件(按种量、起始pH值、培养温度和培养时间)、培养基组成 以及外源谷氨酸钠浓度对Llactis subsp Laetis WHll．1生成丫．氨基丁酸能力的影响。 通过单因素试验、响应面试验及正交试验得出其生成丫-氨基丁酸的最佳培养条件为： 接种量4．5％，培养时间96h，培养温度为32℃，初始pH值为6．0：最佳培养基组成 为：复合碳源质量分数为2％(葡萄糖与糊精质量比为3：1)，复合氮源中蛋白胨与 酵母膏的质量比为1：3，总碳氮比为l：2，盐酸吡哆醛质量分数为O．15％，谷氨酸 钠309／L。在上述条件下，发酵液中Y．氨基丁酸含量可达10．78∥L，约为优化前的4 倍。 关键词：丫-氨基丁酸：乳酸菌；筛选；鉴定 The The Screening and Identification of LAB Strains Isolated from Traditional Dairy Products with 7-Amino B utyric Acid Producing and Optimizing their Fermentation Conditions Abstract 9 LAB strains with relative higll production of T-aminobutyric acid Were screened from 1 80 strains isolated from traditional fermented dairy products using Thin Layer Chromatography(TLC)and High Performance Liquid Chromatography 0-1PLC)．They were WHII-I(2．4779／L)，M10-4—3(1．4059／L)，WZ20·2(1．1329／L)，WZl·2(1．115 g／L)， M11-3(1．0069／L)，SI·1(0．5819／L)，M5—1-1(0．310 p／L)，Mll·2·1(O．225 g／L)andMll-1 (O．211 g／L)． According to the traditional morphological characters，physiological and biochemical properties，as well as chemical characteristics，WHll-1，M1043，M1-2，M11-3 and WZ20—2 was identificated as厶lactis subsp．Lact插，Sl-I，M5—1-1 and Ml l一2—1 as三． plantarum，Ml l一1 as L．saBvarius． Based on traditional identification,the genes of 1 6S rDNA were amplified in vitro and sequenced．Then a phylogenetic dendrogram Was cons