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氧化酶及三糖铁试验.doc
氧化酶及三糖铁试验
1.氧化酶试验:在培养皿中放大小适中的滤纸,加适量1%二甲基对苯撑二胺水溶液使滤纸湿润,用玻棒挑取取肉汁胨培养基上新鲜培养的细菌,涂在滤纸上,观察并记录结果。
2.过氧化氢酶试验(接触酶):挑取培养24h的菌苔一小环涂抹于已滴有5%过氧化氢的玻片上,进行观测。
3.三糖铁试验:无菌操作下将细菌穿刺接种于三糖铁斜面,恒温培养24小时,观察斜面与底部的变化。结果判定根据:
Triple sugar iron agar test (三糖鐵瓊脂試驗)
左1
斜面鹼性(紅), 底部鹼性(紅)
左2
斜面鹼性(紅), 底部酸性(黃)
產硫化氫
右2
斜面酸(黃), 底部酸(黃)
產氣
右1
控制組
Triple sugar-iron agar (pH7.4) 三糖鐵瓊脂試驗
Beef extract 牛肉浸膏
3.0
Yeast extract 酵母粉
3.0
Peptone 蛋白胨
15.0
Proteose peptone细菌蛋白胨
5.0
Lactose 乳糖
10.0
Saccharose 蔗糖
10.0
Dextrose 葡萄糖
1.0
Ferrous sulfate硫酸亚铁
0.2
Sodium chloride NaCl
5.0
Sodium thiosulfate硫代硫酸钠
0.3
Phenol red 酚红
0.024
Agar 琼脂
12.0
氧化酶(Oxidase)试验 氧化酶亦即细胞色素氧化酶,为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶,氧化酶先使细胞色素C氧化,然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。 试验方法:在琼脂斜面培养物上或血琼脂平板菌落上滴加试剂1~2滴,阳性者Kovacs氏试剂呈粉红色~深紫色,Ewing氏改进试剂呈蓝色。阴性者无颜色改变。应在数分钟内判定试验结果。
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