如何利用SpectraDrop超微量微孔板进行DNA定量-MolecularDevices.PDFVIP

如何利用SpectraDrop超微量 微孔板进行DNA定量检测 By Cathy Olsen, Ph.D., Molecular Devices, LLC, 1311 Sunnyvale, CA, 94089. 引言 Materials Molecular Devices公司的SpectraDrop™ • SpectraDrop超微量微孔板 超微量微孔板(原先称为µMax)让用户在 • 无绒或低绒一次性吸水纸 SpectraMax®微孔板读板机上可一次检 测多达64个样品，而上样体积仅2 µL。 • 空气除尘器(罐装压缩空气) SpectraDrop微孔板带有一套专门设计 • 70%乙醇溶液(或其它有机溶剂如甲醇或丙酮) 的适配器和玻片，此玻片在光吸收和荧光 • 双链DNA(如Sigma P/N D1501-1G) 检测下的光学透性完全满足用户对应用的 苛刻要求(图1)。SpectraDrop微孔板的 • 去离子水或TE缓冲液 特殊玻片设计无需校正，可保持孔间测读 • 可移取2或4 µL的8-通道移液器 的一致性，孔间CV低于5%。 • SpectraMax® 微孔板读板机，带光吸收检测功能 SpectraDrop微孔板套装包含以下部分： • SBS-标准微孔板适配器 • 24-孔超微量样品载玻片或64-孔超微 量样品载玻片 • 0.5 mm光程(透明)盖玻片，针对2-µl上 样体积 SpectraDrop超微量微孔板配置(图1) • 1.0 mm光程(蓝色)盖玻片，针对4-µl上 盖玻片 样体积 微量体积 使用紫外光吸收来定量检测多种样品类型 样品载玻片 是一种常用的方法。获得最优检测结果的 一个决定性因素就是降低样品或光学表面 污染所产生的背景噪音。这篇应用文章描 述了如何通过简单、常规的维护和清洁步 骤即可得到高质量的结果。 SpectraDrop 微孔板适配器 超微量样品载玻片上有专门的小孔用于24或64个样品上样。盖玻片有0.5-mm或1.0-mm两种间 隔可选，分别用于2-µL或4-µL上样量。 1 Methods DNA 标准曲线(图 2) 清洁SpectraDrop玻片 捏住SpectraDrop玻片边缘将其拿起， 在黑色背景下检查上面是否粘有污渍或灰 尘。戴无粉乳胶手套有助于减少指印和皮 肤油脂的污染。如果发现有污渍或灰尘， 可使用一次性实验室用纸清洁玻片。要去 掉顽固的污渍或指印，需要用到沾了水或 乙醇的实验室用纸来清洁。不会留下擦拭 痕迹的抹布等也可代替实验室用纸。 对于大多数的样品检测，用一次性实验室 用纸简单的擦拭玻片就足够了。如果预计 样品浓度太低或希望降低背景噪音，以下 步骤会很重要。重新在黑色背景下检查玻 片，确保没有灰尘微粒。使用带空气罐的 ® 除尘器将任何可见的灰