半乳糖化胆固醇配体介导的多烯紫杉醇脂质体的药物动力学及其组织分布研究药剂学专业论文.docxVIP

广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明： 广州中医药大学学位论文原创性声明 本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工 作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，一本论文不含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均 已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名j缉 日期：20／s年g月2,0日 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向 国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中 医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影 印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名辩论文导师签名衅 日期：2 015年乡月加日 中文摘要 中文摘要中又摘要 目的： 半乳糖化胆固醇配体(5-cholesten一3 B—y1)[(4-0一B—D—galactopyranosyl) D-glucitol一6]decanedioic acid(CHS—DD—LA)是本实验室采用新型非水相脂肪酶 催化手段合成的一种半乳糖配体。该配体能被存在于肝实质细胞上的去唾液酸糖蛋白 受体(ASGP—r) 特异性识别，可作为肝靶向给药系统的靶头用于肝靶向给药系统如 脂质体，聚合物胶束等微粒给药系统的制备。本实验室已成功制备了多烯紫杉醇脂质 体，在此工艺基础上加入该半乳糖化胆固醇配体，进一步制备得到具有肝靶向的多烯 紫杉醇配体脂质体。经质量标准考察，该配体介导的脂质体各项指标都在药典规定的 范围内。本论文旨在对该配体脂质体的大鼠体内药动学特征进行了考察并通过组织分 布研究考察了其在小鼠体内的肝靶向性效果，通过LC-MS／MS建立了血浆及组织样品 中多烯紫杉醇含量的测定方法。为新药报批及进一步非临床研究提供一定的实验基 础。 方法： 1、以紫杉醇为内标，采用LC—MS／MS法，建立血浆及组织等生物样品中多烯紫杉 醇含量测定的方法。 2、选用SD大鼠为动物模型，分别进行多烯紫杉醇配体脂质体不同剂量的药动学 研究，选取的剂量分别是：2．5mg-kg～、5mg·kg～、7．5mg·kg～。考察时间为：0．083h、 0．25h、0．5h、lh、2h、4h、6h、8h、lOh、24h。得到多烯紫杉醇肝靶向配体脂质体 低、中、高三个不同剂量的药动参数。根据不同剂量的药动学参数，选取出最适剂量， 设置多烯紫杉醇配体脂质体，多烯紫杉醇普通脂质体，多烯紫杉醇注射液三个不同制 剂组，比较三种不同制剂的药动学特征。用DAS2．．0软件绘制药动学曲线。 3、选用KM小鼠为动物模型，考察多烯紫杉醇配体脂质体在小鼠体内的的组织分 布特征。设置多烯紫杉醇配体脂质体，多烯紫杉醇普通脂质体，多烯紫杉醇注射液三 个不同制剂组进行比较。考察时间为：5min、lOmin、20min、30min、60min、120min、 240min。引入4种肝靶向参数：相对摄取率(Relative intake efficiency Re)， 靶向效率(Targeting efficiency W。)，相对靶向效率(Relative targeting efficiency RT。)，峰浓度比(Peak concentraton efficiency C。)用以衡量该制 剂的靶向性。 结果： 1、本论文成功建立了以LC—MS／MS为方法的血浆样品、组织样品中多烯紫杉醇含 量的检测。以紫杉醇为内标，其专属性、标准曲线、准确度、精密度、重复率、基质 效率等方面的考察数据表明该检测方法具有稳定性好，精密度高，准确性好、效率高 效率等方面的考察数据表明该检测方法具有稳定性好，精密度高，准确性好、效率高 等优点。通过提取回收率的考察筛选出了血浆及组织样品处理的最佳方案。 2、大鼠单次尾静脉注射多烯紫杉醇配体脂质体2．5 mg·kg～、5 mg·kg～、7．5 mg·kg_ 三种不同剂量后，药动学参数C。一AUC呈明显的剂量正相关性，而t眈、CL等与剂 量的相关性不显著。根据实验需要及合理性选择低剂量2．5mg·kg‘1进行多烯紫杉醇配 体脂质体、多烯紫杉醇普通脂质体、多烯紫杉醇注射液--it不同制剂的药动学结果比 较。三种不同制剂按2．5mg·k91剂量给药后分布半衰期t忱。(h)分别为0．13±0．027， 0．06±0．012，0．02±0．007；CL分别为1．71±0．164，2．3l±0．118，4．08±0．803； 平均滞留时间MRT分别为2．46±0．089，2．10±0．121，1．67±0．212。 3、小鼠单