僵蚕和蜈蚣醇提取抗惊厥作用的药效学比较研究.doc

僵蚕和蜈蚣醇提取抗惊厥作用的药效学比较研究来源： HYPERLINK javascript: 中国论文下载中心????[ 12-04-15 09:46:00 ]????作者：姚宏伟????编辑：studa090420 ????? ????????本实验结合中医理论，按照化痰、息风、行气、补气、泻火的 HYPERLINK /Medicine/ 治疗原则，选取僵蚕（SS）和蜈蚣（CP）的醇提物作为研究对象，利用经典的最大电休克惊厥（MES）、戊四唑（MET）惊厥模型，对抗痫西药为阳性对照，对两种中药提取成分的量效、时效、效能、效价进行比较研究；同时采用药效法，模拟两药的体内过程。为中医药治疗癫痫提供理论依据，为抗痫新药开发利用奠定药 HYPERLINK /lixue/ 理学理论基础。 ????????1??材料 ????????1.1动物??健康普通级昆明种小鼠，体重18-22g，雌、雄皆用，符合国家健康一级动物标准。 ????????1.2药品及试剂 ????????1.2.1药品??实验用蜈蚣、僵蚕，均为全虫，经山西医科大学药学系植化教研组鉴定后用于实验；拉莫三嗪，用生理盐水配制。 ????????1.2.2药品的加工??蜈蚣、僵蚕的乙醇回流提取：将生药材研碎后，加入相当于药材量的4倍体积的65％的乙醇，浸泡24h然后用回流方法加热煎煮2次，每次1.5h，纱布过滤，合并2次滤液，用旋转蒸发仪均浓缩成400％(W/V)溶液；上述药材加工完毕后均置于冰箱冷藏备用；使用时用蒸馏水稀释至所需浓度。 ????????1.2.3试剂??MET；无水乙醇为分析醇，用蒸馏水配制至所需浓度。 ????????1.3仪器??JY-Ⅱ型电惊厥仪；圆底回流装置；旋转蒸发仪RE-52AA；DZTW型调温电热套。 ????????2??方法 ????????2.1MES实验 ????????2.1.1MES模型的建立??采用Swinyard等的方法稍加改良。用两个耳电极夹住小鼠双耳部。电刺激参数：刺激强度100V、频率6Hz?、时间0.4s。以后肢强直为MES指标。 ????????2.1.2实验动物分组及给药??取健康昆明种小鼠420只，雌、雄各半，分为4组，每组随机分为4-6个剂量组，每个剂量组20只，均采用灌胃给药法，正常对照组灌胃等容积的生理盐水，灌胃容量0.1ml/10g。各剂量组的给药剂量：僵蚕组为5、10、20、30、40g/kg；蜈蚣组为10、20、30、40g/kg；拉莫三嗪组为0.001、0.002、0.004、0.008、0.016、0.032g/kg。 ????????2.1.3量效、时效关系的测定??各剂量组小鼠灌胃给药后，分别于15、30、45min，1、2、3……13h用上述同样参数刺激，记录抗MES数， HYPERLINK /pc/ 计算抗惊率，分析各药作用高峰期的量效关系，用Bliss法计算各药的半数有效量ED50、ED95，比较各药的效价强度及效能。以各药最大剂量组不同时间点的抗MES结果作时效关系分析，比较各药的起效时间、达峰时间和作用持续时间。 ????????2.2抗MET惊厥实验??取健康昆明种小鼠40只，雌、雄各半，随机分为4组，每组10只。? 各药以抗MES惊厥的ED50为给药剂量：①僵蚕组18.74g/kg；②蜈蚣组19.43g/kg；③拉莫三嗪组0.0048g/kg；④正常对照组灌胃等容积的生理盐水；以上各组均采用灌胃给药法，灌胃容量0.1?ml/10g；于各药作用高峰期皮下注射(sc)MET?100mg/kg，以全身阵挛性惊厥为观察指标，记录惊厥潜伏期、惊厥数和死亡数，计算抗惊厥率和病死率。 ????????2.3药效动力学研究方法 ????????2.3.1量效实验??详见实验2.1.3ED50的测定。 ????????2.3.2时效实验??取健康昆明种小鼠40只，随机分为两组，每组20只，分组同ED50的测定(详见实验2.1.3)。各组小鼠灌胃抗MES惊厥最大效应量后，分别于15、30、45min，1、2、3h……用上述同样参数刺激，记录抗MES数，计算抗惊厥率。 ????????2.3.3药效动力学参数计算??先将上述测试结果作房室模型拟和，检测是否符合一室模型，药效动力学参数按量效方程、时效方程、时间—体存生物相当药量方程等计算。转贴于 中国论文下载中心 3??结果 ????????3.1僵蚕和蜈蚣醇提物抗MES效应比较 ????????3.1.1量效关系比较??这两种醇提物均有不同程度的抗MES作用，且量效呈正相关性。蜈蚣的最大抗惊厥率为20％，僵蚕的最大抗惊厥率为40％，与生理盐水对照组比较差异有统计学意义，但均不及拉莫三嗪。 ??????