粗毛栓菌的木质纤维素降解酶及其基因克隆遗传学专业论文.docxVIP

四川大学博士学位论文4．1锰过氧化物酶基因表达研究概况 四川大学博士学位论文 4．1锰过氧化物酶基因表达研究概况 t 4．2表达调控 ～ 一 5锰过氧化物酶的应用．．· 5 1生物制浆 5．2环境保护方面的应用 6．展望 ” 参考文献 -- ，” “ 弘””卯弛 致谢 148 在凄期间的研究成果 149 声明 150 图形目录 第一章 图1．1粗毛栓苗(Trumetesgallica)的于实体一 ‘13 图1．2不同发酵条件对粗毛拴菌产MnP和漳酶的影响 -． 、．19 图】．3不同氮塬对粗毛栓菌产木质纤维索降解酶的影响 20 图1．4粗毛栓菌在麦草匕生长时产MaP、漆酶和木聚糖酶的趋势图 24 图1．5生长于麦草上的粗毛栓菌所产生的木聚耱酶、纤维寨酶和榛酶的酶谱 26 第二章 图2．I一种不使用两性载体的等电点测定用电泳槽 43 圈2．2粗毛栓菌木质纤维素降解酶的DEAE．Sepharose离子变换层析 ·46 圈2．3粗毛栓菌漆酶、MnP和LiP的SephadexG·t00柱层析圈谱 ‘47 图2．4漆酶(A)和MnP(B)的活性·GAGE分析 一 ’’4B 图2 5纯化棒酶的活性PAGE分析 ’49 图2．6MnP和涟酶的分子置测定 一 ” ” ”50 图2 7蛋白质分子量标准曲线 ·50 图2+8MnP(A)和漆酶(B)等电点的删定 。。一 51 四川大学博士学位论文圈2．9粗毛栓菌M兀P的可见光吸收光谱 四川大学博士学位论文 圈2．9粗毛栓菌M兀P的可见光吸收光谱 ． 一 图2 10pH对MnP活性的影响 国211温度对MnP活性的影响 圈212口H对漆酶活性的影响t 轮虬H 蹦213温度对漆酶活性的影响 图2 14 BSA在梯腹口H缓冲液中的醋酸纤维薄膜电泳 图2 15BSA迁移商观圈 图2．16 BSA等电点的划线测定法 r 图217锋电聚焦注测定BSA的等电点 N”拍弱 第三章 |鲞l 3 I粗毛栓曲息RNA的印醉变性脞电泳幽谱 73 圈3 2微阵列杂交圈 76 图3．3杂交信号的散点圈 76 囤3,4 2244号克隧的序列分析 。 8l 图3．5 1193号克隆编码蛋白与C versicolor热激蛋白的氨基酸序列比较 82 第四章 国4．1 pMDl8-T载体的物理图谱 。 94 图4．2 pPICZ q物理图谱一 95 圈4 3f galliea的总RNA和总eDNA的电泳结果 “ ·104 图4．4Igmnp的PCR扩增 “ 105 目4．5 pT-tgtnnp重组子的PCR及酶切鉴定 ]06 图4．6锰过氧化物酶cDNA片段tgmnp的桩苷酸和推测的氨基酸序列 107 图4．7tghsp的RT-PCR产物电泳 一 108 图4．8pT-tghsp重组子的PCR(A)和限制酶切(B)鉴定 109 囤4．9tghsp cDNA片段的核苷酸和导出的氨基酸序列 ¨O 图4．10 QA-tghsp重组子的PCR及限制眭内切酵酶坜鉴定 11l 图4．1I tgmnp编码蛋白的氨基酸序列与r w眺D胁的MP2的序列比较 114 围4．12tgrnnp编码蛋白的氨基酸序列与P chrysosporimn的LiP的序列比较 ·115 四川大学博士学位论文图413 四川大学博士学位论文 图413 38种MnP同工酶eDNA序列的同源眭比较 图414 zgallfca热激蛋白eDNA的棱苷酸BLAST分析结果 文献综述 幽I锰过氧化物酶的分子结构酗 圈2MrLP的催化反应 t 图3锰过氧化物酶基因的内古子结构 · 圈4 38种M11P同工酶eDNA序列的同源性比较 船∞如把 表格 录 第一童 表1 1因素水平最 15 表I 2止交试验结果 22 表l 3正交试验结果的方差分析 ·23 第二章 表21MrIp和漆酶的纯化效率 -- - 一 第三章 表3，1检出的172个克隆列表 表3．2在Genbank中具有己知功毹的克隆 第四章 表4 1 z gaglica锰过氧化物酶eDNA片段的密码子使用情况 ·113 袁4．2 rgatlica热撒蛋白cDNA智k驴的密码子使用情况 117 文献综述 表1产锰过氧化物酶的真菌 126 四门l大学博士学位论文粗毛栓菌的木质纤维素降解酶及其基因克隆 四门l大学博士学位论文 粗毛栓菌的木质纤维素降解酶及其基因克