金纳米粒子的DNA修饰与暗场显微成像.doc

 金纳米粒子的 DNA 修饰与暗场显微成像# 王康，曹雷* （南京大学化学化工学院，南京 210093） 5 摘要：制备了金纳米粒子并对其进行 DN 修饰过程初步研究。利用暗场显微成像技术对分散于玻璃片表面的 金纳米颗粒进行了成像，并观察了单个金纳米颗粒的散射光谱。为此我们还开发了一种将金纳米粒子固定 在到载玻片表面的新方法，为后续的研究提供了一定帮助。 关键词：分析化学；DNA；金纳米粒子；暗场；成像 中图分类号：O657 10 Dark Field Imaging of DNA Modified Gold Nanoparticles WANG Kang, CAO Lei (School of Chemistry and Chemical Engeneering, Nanjing University, Nanjing, 210093) 15 20 25 30 35 Abstract: Gold nanoparticles were fabricated and the modification of DNA on the gold nanoparticles was studied. Then, dark field microscopy was used to image sigle dispersed gold nanoparticles and the scattering spectrum of gold nanoparticle was also obtained. We also developed a noval method for immobilizing gold nanoparticles on slide glass, which provide facility for futher study. Key words: Analytical Chemistry, DNA, Gold Nanoparticle, Ddark Field, Imaging 0 引言 近年来，纳米粒子在构建分子器件中的应用越来越广泛，尤其是金纳米粒子，因为其特 殊的物理化学性质以及较好的生物相容性，在生物传感[1, 2]，生物催化[3, 4]以及核酸器件的构 建[5, 6]等领域中有着广阔的应用前景。因此，研究固定化于纳米粒子表面的核酸固定化具有 重要的意义。 金纳米粒子早在 1857 年就被合成，1908 年，Mie 对金的表面等离子共振进行了解释， 通过求解 Maxwell 方程对球形金纳米粒子表面等离子体共振进行了定量的描述[7]。表面等离 子体共振是金纳米粒子最重要的性质之一，这一作用使得金胶溶液呈现出红色。不同粒径的 金纳米粒子溶胶颜色不同，因此我们可以测试其紫外-可见吸收峰的方式来判断其粒径和大 致浓度。当金纳米粒子表面修饰了某种分子，由于修饰分子引起环境介电常数变化，其吸收 峰位置也会发生相应的变化。 金纳米粒子在核酸相关研究领域中的应用也很广泛，尤其是在荧光分析方法中，由于共 振能量转移作用，金纳米粒子可以淬灭荧光基团的荧光，所以常被设计在荧光淬灭-恢复模 式的生物传感器中[8, 9]。另外，金胶本身的颜色变化性质，使得比色分析也成为一种核酸分 析的重要方法[10, 11]。 我们对金胶的合成，修饰进行了初步的研究，除了用紫外-可见光谱表征这些过程以外， 还进行了单纳米粒子暗场成像研究，开发了一种新的静电作用固定金纳米颗粒到载玻片上的 方法，获得了单纳米颗粒的散射光谱图。 基金项目：教育部博士点基金（20100091120033） 作者简介：王康（1976—），男，副教授，主要研究方向：核酸，材料，电化学. wangkang@nju.edu.cn -1-  1  单颗粒散射光谱技术 物质对光的散射是自然界最常见的现象之一，散射光的波长与入射光保持一致，但传播 40 方向发生改变，粒子对光的散射符合瑞利定律： I (? )scattering?? I (? )incident ? 4 金纳米粒子在电磁场中可以看作震荡的偶极子，当该震荡频率与某一入射光一致，两者 产生共振，震荡的偶极子便会向四面八方辐射次级电磁波，即我们观测到的某一波长的散射 光[12]。 45 50 55 60 单纳米粒子比如金[13]、银[14]纳米粒子的散射光谱，特别是散射峰位置λmax，与纳米粒 子的位置，大小，形状，方向以及周围电介质环境均有关系[12]，利用生物分子的修饰或反 应，能够改变纳米粒子的散射光谱。利用这种效应，人们已经开展了对生物分子的分析研究 [13, 15] 实验中，我们利用环状镜头形成暗场，在暗场条件下，可以观测到比较微弱的属于单个 纳米粒子的散射光。我们所使用的暗场显微镜与光谱仪的仪器结构如