肺炎支原体mlva分型及其临床意义儿科学专业论文.docxVIP

lIII lIII U IIIIII IIIII IIII II II Y31 1 91 34 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝堑太堂或其他教育机构的学位或证 书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中 作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：懒 签字日期：Ⅺ必 年≯月#日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝迤太堂有权保留并向国家有关部门或机构 送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑堑太堂可 以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 学位论文作者签名：口懈 导师签名： 、疋∥ (保密的学位论文在解密后适用本授权书) V 签字日期：加16年砂月石日 签字日期：c二r乡年≯月M日签字日期：c力r6年少月7。日 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 致谢 致谢 光阴荏苒，硕士研究生的学--j即将结束，三年的学习生活使我受益匪浅，如 今经过磨砺，硕士毕业论文终于完稿，回首收集、整理、思索、停滞、修改直至 最终完成的过程，我得到了许多的关怀和帮助，现在要向他们表达我最诚挚的谢 意。 首先，我要深深感谢我的导师陈志敏教授。陈教授为人谦和，平易近人，对 我学习、工作、生活各方面都给予了无微不至的关怀和帮助。陈志敏教授的渊博 的知识、严谨的治学态度、科学的研究方法、敏锐的学术洞察力、勤奋工作的敬 业精神、乐观的生活态度、幽默的举止谈吐、豁达开朗的性格和高尚的人格魅力 使我终身受益。陈教授以学术研究为乐趣，做一个读书学问的快活人，无不让人 心生敬仰。导师的境界我虽不能至，但心向往之。古人云“先生之风，山高水长”， 这在陈教授身上体现的淋漓尽致。本论文从选题到完成，均是在陈志敏教授百忙 之中抽出时间进行指导后完成的，在此对我的导师陈志敏教授表示由衷的感谢! 同时我要感谢微生物室的陈学军主任给予我良好的实验平台与操作间，使得 我的实验能够顺利进行；师兄杨德华在学-j生活中无私的帮助，在我几次灰心丧 气之际给予我莫大的支持与鼓励，使得我能顺利的完成实验。感谢师兄王颖硕， 师姐张园园、周云莲、李淑娴、李雪静，师妹王雨婷、钟李嘉，没有你们的支持 与倾心的帮助，我是无法解决困难与疑惑，从而完成论文。 另外我也要感谢我的父母和朋友，是你们默默的支持和无私的关怀，使我能 够顺利完成学业! 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 肺炎支原体MLVA分型及其临床意义 浙江大学医学院 儿科学 硕士研究生 叶倩 导 师 陈志敏教授 中文摘要 研究背景及目的： 近年来随着肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae，MP)基因组学研究的发展， 关于MP基因型与MP菌株变异、病情进展、耐药及治疗等方面的关系受到了越 来越多的关注。在分子水平上对MP菌株进行分型可以较好地进行流行病学监测 并研究疾病的发生发展和转归。目前国内外对MP菌株的传统分型方法受限于 MP基因序列保守性，只有包含少量的点突变的开放阅读框架(Open reading frame，ORF)及MP管家基因、结构基因较难发现多态性，故对MP区分度较低。 多位点可变重复序列分析(Multiple．10cus variable—number tandem．repeat analysis， MLVA)是近年来发展起来的一种以PCR为基础，根据所检测的菌株基因序列中 不同位点的、可变数目串联重复序列(Variable．number tandem repeats，VNTR) 的重复单元拷贝数的差异来进行分子分型的技术。该分型方法可以将菌株分型变 得更为细化，有利于临床诊断、治疗及流行病学的监测。 为建立MLVA分型体系并探讨其临床意义，本文采用MP感染儿童的口咽拭 子(Oropharyngeal swabs，OP)进行体外分离培养，将所获取的临床菌株采用双 探针荧光定量聚合酶链式反应(Real．time polymerase chain reaction，real—time PCR)、基于Pl黏附蛋白基因限制性酶切图谱(Restriction fragment length