使用QuickDrop分光光度计进行核酸定量和分析-MolecularDevices.PDFVIP

使用QuickDrop分光光度计进行核酸定量和分析 简介 材料和方法 优点 分光光度测定法是一项定量和分析生物成 • QuickDrop 紫外-可见分光光度计 • 最小样品量低至0.5 µL 分的成熟技术。其中，核酸是生物实验室 (Molecular Devices cat. #QUICKDROP) 最常检测的生物成分之一。确定这些样品 • 从1.0 ng/µL到2,500 ng/µL的 • UltraPure ™ 小牛胸腺DNA溶液 的浓度和纯度对许多下游实验至关重要， 精确DNA定量 (Thermo Fisher cat. 例如PCR、qPCR测序和DNA基因芯片。 • LCD触摸屏可独立完成实验 • RNA Control 250 核酸主要吸收260nm下的紫外光，其浓度 及数据分析 (Thermo Fisher cat. #AM7155) 可以应用比尔-朗伯特定律通过它们的相 • 比色皿法可进行动力学法和波 关消光系数和样品光程计算出来。首先， • 10 mm 远紫外石英比色皿 长扫描 260nm的紫外光直接照射样品，并且穿过 (Starna Cells cat. #9-Q-10) 样品，而另一边的光电检测器则测定有多 少光被吸收。通过对照参比(一般是样品稀 释液)，可以定量样品中的核酸浓度。 样品交叉污染 样品纯度是核苷酸定量的一个重要指标。 样品交叉污染通过使用超微量上样孔交替 尽 管 不 是 确 定 纯 度 最 准 确 的 方 法 ， 检测小牛胸腺DNA和超纯水进行评价。超 A260/A280和A260/A230依然可以用来 纯水作为参比。超微量孔在每次读数完成 粗略估计蛋白和化学成分的污染程度。 后用不起毛的纸擦拭干净。 SpectraMax® QuickDrop ™分光光度计 是一款多用途的紫外-可见(UV-Vis)超微 量分光光度计，尤其是在分析核酸样品方 标准曲线的线性 面。它包含一个0.5 mm超微量上样孔、比 溶于超纯水中起始浓度为2500 ng/µL的双 色皿插槽和内置的LCD触摸屏，使用者可 链DNA(dsDNA)经两倍系列稀释。超纯水 以在这一个系统上进行多种实验。 作为空白，每个样品浓度都在0.5-mm超 微量上样孔中读3次。利用预设好的DNA 在这一应用指南中，我们展示了Quick - 定量方法，从230nm到320nm波长下检 Drop分光光度计是如何以高准确度和高一 测器吸光度值。DNA定量法自动计算出 致性来定量(浓度)和定性(样品纯度)分析核 d s D N A 浓 度 ， 基 于 计 算 方 程 及 以 下 酸样品的。 260nm