双歧杆菌生理功能特性及其应用的研究食品科学专业论文.docxVIP

孟祥晨 孟祥晨 中文摘要 2002年5月 双歧杆菌生理功能特性及其应用的研究 摘要 双歧杆菌(Bifidobacterium)是人和动物肠道内重要的生理性细菌，它的存在直接影正 响消化道的健康状况，虽然此菌重要，但其作用机理尚需深入研究。，黝本濒通过体 内及体外实验方法，共计七个实验，包括所研究菌的分离与鉴定：生长特性的研究；影 响其存活因素的研究：对病原菌的生物拮抗；对肠粘膜的粘附与定植；对试验动物的免 疫调解机理以及含双歧杆菌产品的开发，系统研究了该菌的生理功能与作用机理及其应 用。 f应用TPY液体培养基，比较了两株商品菌株(占adolescentis，Ba；B infantis，Bi)、 两株由产品分离菌株(Blongum，BI；B breve，Bbr)以及两株分离自婴儿粪便菌株 (B．bifitm，Bb：Blongum一，，B1．1)的生长与产酸能力，发现：Bi生长速度比Ba快， 产酸能力却弱，前者无明显的生长迟滞期，后者却相反。Bl和Bbr均无明显的生长迟滞 期，培养48hr，菌液吸光值分别为2．348和2．162。培养Bb和Bl-l达48hr，其吸光值 分别为1 400和1 447。商业生产株生长及产酸性状优于来自婴儿粪便的新分离株。 应用模拟胃液pH、胃液、肠液、肠胆盐环境，研究Ba、Bi、Bl和Bbr的抗消化道 逆环境特性。在pHl．5酸性条件下作用l，5hr，存活率分别为O 14％、17 86％、49 09％ 和9 53％。在加有胃蛋白酶的模拟胃液中作用1．5hr，存活率分别为：45．39％、97 27％、 84 53％和85 5l％。在含胰蛋白酶的模拟肠液中作用12hr，存活率分别为：2917／o、4797％、 87 70％和77 27％。Ba、BI和Bbr的活菌数随胆盐浓度升高而下降，2％胆盐浓度条件下 作用12llr．三者的存活率分别为5 92％、13 96％和61 240。而Bi在各胆盐浓度条件下， 均有生长趋势，这种趋势随胆盐浓度升高而下降。消化道逆环境对此菌的存活有不同程 度的影响．以Bi和Bl的耐性最好。 Ba、BI、Bbr和Bi分别与沙门氏菌共同培养20小时后，前三者使沙门氏菌的菌数 低于102cfu／mL，而Bi中却为1．3×108cfu／mL。将pH值接近4的四株菌的上清液和OIM、 pH4的乙酸．乳酸(3：2)混合酸液以一定比例加入培养基中，培养沙门氏菌，发现酸液 对沙门氏菌的抑制作用最强：Ba、BI和Bbr上清液的抑制强度相近，但不及酸液：Bi 上清液的抑制作用最差。将酸液和上清液的pH调至7后，对沙门氏菌的生长趋势无影 响．但各阶段菌数均低于对照组。 通过扫描电镜观察细菌在仔猪肠粘膜的粘附状况，发现肠道菌群与粘膜表面的粘液 层有密切的联系。采用放射性代谢标记方法研究双歧杆菌与仔猪肠粘膜粘液糖蛋白的粘 附，发现Ba的粘附能力最强，为44 61％；其次是Bbr，为33 20％：Bi和B1分别是18,40％ 和1l 78％。相同的实验方法观察到：所实验的糖、初乳粉以及Bi、Bl、大肠杆菌和沙门 氏菌上清均能导致Ba粘附下降，而Ba和Bbr上清却有促进其粘附的作用。 博士学位论文 博士学位论文 双歧杆菌生理功能特性及其应用的研究 东北农业大学 应用动物实验方法，研究Bi和Bl对正常小白鼠免疫功能的调节作用以及对免疫力 低下模型动物的预防与治疗作用。发现：两株菌对正常小白鼠体重、脾／体重和肾／体重 比无显著性影响；对肝，体重比有增加趋势；能显著增加血液中IgA、IgG、C3、C4、IL-2、 IL．6和IL．8的含量(pO 05)，Bi效果优于Bl：Bi可极显著增加IgM的含量(pO．01)。 两株菌均可显著增加双歧杆菌(pO．05)和乳杆菌的数量，显著降低大肠杆菌的数量 ． (pnD5)。结果表明：两株菌都能增强正常BALB／C小白鼠的免疫功能，并具有良好 调节肠道菌群能力，Bi效果优于B1。 同时对BALB／C小白鼠施以环磷酰胺和双歧杆菌，发现：环磷酰胺导致体重、胸腺 ／体重、IgA、IgG、IgM、C4、IL．2和IL．8显著下降(pD．05)，两株菌能显著预防IL．2、 IL．6和IL．8的下降(pn酊)，Bi效果优于Bl，对其他几个指标有轻微恢复作用，效果 不显著。两株菌都可增加双歧杆菌与乳杆菌的数量，降低大肠杆菌数量(pn∞)。 对免疫力低下的昆明小白鼠模型施以双歧杆菌后发现：两株菌对胸腺，体重、IL．2和 I