华支睾吸虫囊蚴在活鱼体存活时间试验观察-中国病原生物学杂志.DOCVIP

华支睾吸虫囊蚴在活鱼体存活时间实验观察﹡ ﹡ 江西省科技计划项目，编号 柯长征 江西省瑞昌市血吸虫病防治站；332200.，柯寒臣 江西省瑞昌市血吸虫病防治站；332200. 江西省瑞昌市血吸虫病防治站；332200. 江西省瑞昌市血吸虫病防治站；332200. 江西省瑞昌市人民医院；332200. 江西省瑞昌市人民医院；332200. 我们于2011年至2016年，对华支睾吸虫囊蚴在活鱼体存活时间进行了实验观察。方法：人工养殖获取第二代麦穗鱼，用华支睾虫卵感染纹沼螺获取尾蚴，并将尾蚴感染第二代鱼获得华支睾囊蚴。然后观察囊蚴在活鱼体存活时间。结果：鱼体囊蚴数目－年后逐渐减少，三年后基本消失。 关于华支睾吸虫囊蚴的研究有不少报道：例如华支睾吸虫囊蚴在不同条件下存活的观察[1]，鱼体华支睾吸虫囊蚴自然感染状态及保存液中存活情况[2]，囊蚴在不同温度及醋、醬油生存时间[3]，自然干燥对鱼体华支睾吸虫囊蚴感染性的初歩观察[4]，而华支睾吸虫囊蚴在活鱼体存活时间，仅在1979年徐秉坤：认为自然感染华支睾吸虫囊蚴的白皖鱼苗，在没有再感染的条件下饲养，从第三个月开始鱼体囊蚴数目逐渐减少，一年后基本消失[5 ]。华支睾囊蚴是感染终宿主的重要阶段,鱼是华支睾囊蚴寄生的重要环节。因此，深入了解华支睾吸虫囊蚴在活鱼体存活时间，认为有一定的必要性。 我们认为目前尚缺乏较完整的华支睾吸虫囊蚴在活鱼体存活时间的实验研究。然而，我们用了6年时间进行了实验观察。 材料来源： 1 .1 2011年1月，在室外建造4mx3.8mx1.5m大小能溶22.8m3水量的养鱼池，池底备有可供鱼越冬或避署居处。同年4月，从未有华支睾吸虫易感螺的池塘取水于池内，再从本地捕获麦穗鱼[6]30尾放入池中养殖，6月见有鱼苗孵出，12月去除母鱼，保留300尾第二代鱼苗继续饲养。 1 .2 2011年3月，从华支睾吸虫疫区捕获麦穗鱼28尾，用玻片压片镜检见有华支睾吸虫囊蚴，再用人工消化液[7]消化处理，取华支睾吸虫囊蚴400个，经口腔感染本地成年中华田园犬1只，以获取华支睾吸虫虫卵。 1 .3 2012年4月，从本地拾取纹沼螺[8]100个，在室内用70㎝×40㎝×30㎝大小的玻璃缸人工养殖，5月获取第二代幼螺200个，6月幼螺壳高长至2㎜-3㎜，宰杀已经感染了华支睾吸虫囊蚴的中华田园犬，取其肝胆管及胆囊內虫卵，水洗沉淀后用点滳毫升计数法，按1:30螺卵比例，将200个幼螺和6000个虫卵，按比例分放在5个10㎜×1.5㎜培养皿中，用纱窗网扎紧，再放入玻璃缸中加水至20㏕深，强行感染48h。8月将感染了虫卵的螺单个放到小玻璃杯中加水6㏕，逸尾蚴1h，经镜检见有华支睾吸虫尾蚴。 1 .4 2012年9月，将125只正在释放华支睾尾蚴的纹沼螺和人工养殖的286尾第二代华支睾囊蚴阴性麦穗鱼，按比例分放在5个70㎝×40㎝×30㎝大小的玻璃缸中，让尾蚴感染鱼体。感染10天后把鱼再放回到养鱼池中饲养。一个月后从池中取鱼压片镜检，见有许多发育成熟的华支睾吸虫囊蚴。 方法与结果 2 .1 观察鱼体囊蚴减少，2012年10月28日，从养鱼池中捞鱼3尾，在其相同部位各取0.2g鱼肉分4次压片镜检，囊蚴数为：62、43、40、31，45、38、20、25，74、43、55、42，镜检0.6g鱼肉平均囊蚴43个。之后每月一次定时观察，凡囊蚴平均少于43个则视为鱼体囊蚴减少。2013年10月发现鱼体囊蚴不足平均数，则视为鱼体囊蚴减少。 2 .2 观察鱼体囊蚴消失，继华支睾囊蚴在鱼体减少之后，仍持续每月定时观察鱼体囊蚴消失时间。据观察鱼体表层的囊蚴首先消失，深部鱼肉的囊蚴消失较慢，夏秋季节囊蚴减少较快。在持续观察过程中，当取部分鱼肉不见活囊蚴时,则取整尾鱼肉观察,若整尾鱼仍不见囊蚴，则从鱼池再取鱼镜检，总之每次以查见活囊蚴为止。2016年6月，一次性压片镜检鱼池中52尾鱼绝大部分鱼肉，同时又将取过鱼肉的剩余部分用消化液消化观察，均未找到华支睾囊蚴，因此，视为鱼体囊蚴消失。 2 .3 观察鱼体囊蚴结果，自2012年9月华支睾吸虫尾蚴感染鱼体获得囊蚴，于2013年10月鱼体囊蚴数目减少，历时2个年头，实为13个月；2016年6月华支睾吸虫囊蚴在鱼体完全消失，历时5个年头，实为44个月。 讨论 华支睾囊蚴在鱼体开始减少和消失时间与以往报道相差较大，本次是用人工养殖和感染方法获得第二代鱼及囊蚴，认为其方法更具合理性。华支睾囊蚴可寄生多种鱼类[9]，囊蚴在鱼体存活时间的长短，对华支睾吸虫病的流行动态会产生重要影响，囊蚴在鱼体存活时间越长，流行的范围就越广，人群感染机率就越大。因此，了解华支睾囊蚴在活鱼体存活时间，认为在流行病学上有重要意义。