中国对虾来源哈维氏弧菌鉴定及生物学分析.PDF

中国农学通报 2019,35(3):34-39 Chinese Agricultural Science Bulletin 中国对虾来源哈维氏弧菌鉴定及生物学分析 樊 英，许 拉，王晓璐，盖春蕾，叶海斌，刁 菁，李天保 （山东省海洋生物研究院，山东省海水养殖病害防治重点实验室，山东青岛266104 ） 摘 要：从患病中国对虾中分离到优势菌株，对其进行生理生化特性及分子生物学分析。TCBS 培养基 上菌落呈现绿色（以下称为TCBS-G ），通过形态学、生理生化分析，菌株TCBS-G 为革兰氏阴性菌，短杆 状，两端钝圆，有鞭毛；Biolog GIII 分析表明，该菌株生长代谢利用情况与弧菌吻合，与哈维氏弧菌特征 相似。基于16S rRNA、gyrB 、HSP60 基因序列分析同源性，16S rRNA 未将TCBS-G 有效鉴定，gyrB 、 HSP60 基因序列与哈维氏弧菌相聚类，聚合置信度可达99% 。综合生物学及分子特征，判定TCBS-G 为 弧菌属的哈维氏弧菌(Vibrio harveyi) 。底物平板试验结果显示TCBS-G 菌株胞外产物具有淀粉酶、蛋白 酶、脂肪酶和DNA 酶活性；且能够扩增出哈氏弧菌溶血素基因的保守特异性片段。 关键词：中国对虾；哈维氏弧菌；Biolog ；16S rRNA；gyrB ；HSP60 中图分类号：S945.1，S917 文献标志码：A 论文编号：cas IdentificationandMolecularCharacteristicsofVibrioharveyifromFenneropenaeuschinensis FanYing,XuLa,WangXiaolu,GaiChunlei,YeHaibin,DiaoJing,LiTianbao (ShandongProvincialKeyLaboratoryforDiseaseControlinMariculture,MarineBiologyInstituteofShandongProvince, QingdaoShandong266104) Abstract: In this study, the dominant strain was isolated from diseased Fenneropenaeus chinensis, the biochemicalandmolecularbiologicalidentificationwereconductedforthisstrain.Thestrainwasgreenon TCBSmedium(thusdesignatedasTCBS-G).Basedonphysiologicalandbiochemicalanalysis,TCBS-Gwas identifiedtobeGram-negative,inshortrodshape,bluntends,andwithflagellum.BiologGIIIexperiment showedthatthegrowthandmetabolismofTCBS-GweresimilartothatofVibrioharveyi.HomologyofTCBS- GwithVibrio spp.wasanalyzedbasedonthesequencesof 16SrRNAgene,gyrB and HSP60.Basedonthe sequenceof 16SrRNAgene,TCBS-Gwasnotidentified.PhylogenetictreebasedongyrBand HSP60 genes showedthatTCBS-GclusteredtogetherwithV.harveyi,withahighbootstrapvalueof99%.Insummary,all aboveresultsconfirmedthattheisolatedstrainTCBS-GwasV.harveyi.Thesubstrateplatetestsho