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葡萄糖测定SOPGLU临床意义.doc
葡萄糖测定 版本号:
页码:第页共页
1检测原理
在5’ -三磷酸腺昔(ATP)和镁存在的条件下,己糖激酶(HK)催化葡萄糖的磷酸化,从而形成葡 萄糖-6-磷酸(G-6-P)和二磷酸腺昔(ADP)O烟酰胺腺啜吟二核昔酸(NAD)存在的条件下,G-6-P随 后被葡萄糖-6-磷酸脫氢酶(G-6-PDH)氧化,继而生成6-磷酸葡萄糖盐和还原型烟酰胺腺卩票吟二核苛 酸(NADH)o每存在一个摩尔的葡萄糖,一个摩尔的NAD即被还原成一个摩尔的NADH0由NADH引起的吸 收率(同时也是葡萄糖浓度)是用双波长的(340和383nm)终点技术测定。
葡萄糖+ ATP HK 葡萄糖-6-磷酸盐+ ADP
?
MG++
葡萄糖-6-磷酸盐+ NAD, G-6-PDH 6-磷酸葡萄糖盐+ NADH + H
?
2标本采集与处理
1采血方法
空腹采不抗凝静脉血或氟化钠抗凝静脉血2?3ml°
2.2标本保存
肌酊在血清或血浆中冷藏可稳定7天,可无限期冷冻保存。肌酊在尿液中在室温可稳定2-3天, 冷藏稳定5天。
3注意事项
糖酵解将使室温屮放置的正常未离心的凝固血液屮的血清葡萄糖每小时下降大约5%到7%o在 分离的但未溶血的无菌血清中,葡萄糖浓度在25 ° C条件下将保持稳定8小吋,在4 ° C条件下 将保持稳定72小时;在更长的储存条件下将发生稳定性的变化。3在样本中加入碘醋酸钠或者氟化钠 (NaF)后,糖酵解可以被抑制,并且葡萄糖在室温下最长可以保持稳定3天。标本应避免溶血、脂血、 黄疸。
3试剂和设备
1试剂
采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。
1. 1试剂组成
试剂船 1 ?6 孔为 HK15U/mL,葡萄糖-6-磷酸盐 30U/mL , NAD8mmol/L, ATP 15 nmiol/L, MG7. 4 nunol/L, 稳定剂,缓冲液,液体。
1.2试剂准备
直接使用。
葡萄糖测定 版本号:
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1.3试剂保存
试剂2-8°C保存,有效期内稳定。
2质控品
美国BIORAD液体多项质控品。
3.3校准品
西门子校准品。
4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全 口动生化分析系统。
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品一离心- 上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。
2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
3标本处理
以2500-3000r/min,离心6?lOmin,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8°C保存。
4.4标本检测
4. 1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字,按enter,在Sample No处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的 按键改变Mode (按F7:MEXT MODE选择样品管类型)、Priority (按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式)、Fluid (按F8:NEXT FLUID选择标木类型)。
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行 样品检测。
4. 4检验后标本保存
标本检验完成后用釆血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。
5校准程序
1校准品准备和储存
每瓶加2.0ml蒸懈水复融,轻轻旋转摇匀,室温放置30min,即可使用。
2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。
葡萄糖测定 版本号:
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3校准程序
主屏幕按 F5:PROCESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-F2:SET-UPRUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名0 perator.校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4: ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样 品架上,按F7: LOAD/RUN-F4: RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
1质控品准备和储存
质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10??70°C可保存到瓶身有效期,未开启2-8°C可保 存90d,开启后2?8°C可保存30d。
2质控水平和分析批长度
每24
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