细胞生物学试验操作规程细胞形态与功能的适应试验操作规程.PDF

6、细胞生物学实验操作规程： 细胞形态与功能的适应实验操作规程 1. 在实验前向学生讲解常用临时装片的制作方法及注意事项。 2. 实验材料 西红柿、红辣椒、洋葱、芹菜、韭菜、显微镜、0.1%亚甲基兰、生理盐水、载玻片、盖玻片等。 3. 制片方法 3.1 撕片法：红辣椒、洋葱、芹菜和韭菜。 3.2 涂片法：人口腔上皮细胞和西红柿果肉细胞。 3.3 切片法： 4. 制片观察 4.1 西红柿果肉细胞涂片观察。 4.2 红辣椒表皮细胞临时装片观察（示胞间连丝）。 4.3 洋葱、芹菜和韭菜表皮细胞临时装片观察。 4.4 柿种子胚乳永久制片观察（示胞间连丝）。 4.5 人口腔上皮细胞涂片观察。 4.6 人血涂片观察。 4.7 疏松结缔组织永久制片观察。 4.8 骨骼肌细胞纵横切永久制片观察。 4.9 脊髓前角运动神经元观察。 5. 绘图 红辣椒表皮细胞（示胞间连丝）；洋葱、芹菜或韭菜表皮细胞；人口腔上皮细胞（3～5个），人血细胞； 脊髓前角运动神经元。 6. 讨论 细胞形态多种多样，细胞形态结构的差异与它们所执行的生理功能有关。试列举5 种不同功能的细胞， 具体说明细胞形态结构与功能适应。 细胞器的分离与观察实验操作规程 1. 在实验前向学生介绍匀浆器和高速离心机的使用方法及注意事项，介绍用差速离心法分离细胞器的一般 操作程序。 2. 实验器材 冷冻高速离心机、玻璃匀浆器、恒温水浴锅、剪刀、漏斗、尼龙织物、温度计、离心管、显微镜、载 片、盖片、吸水纸、镜头纸。 3. 实验材料与试剂 小鼠、生理盐水、 0.25mol/L 蔗糖—0.01mol/LTris-盐酸缓冲液（ pH7.4）、0.34mol/蔗糖 —0.01mol/LTris-盐酸缓冲液（pH7.4）、0.34mol/L蔗糖—0.5mmol/LMg（AC）2 （pH7.4）、0.88mol/L蔗糖 —0.5mmol/LMg（AC）2 （pH7.4）、RSB溶液、甲醇-冰醋酸固定液、姬姆萨染液。 4. 实验步骤 制备小鼠肝细胞匀浆→用差速离心法将细胞核、线粒体、溶酶体等逐一分离出来（细胞器沉降的顺序 依次为细胞核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体）→分离物的鉴定。 5. 绘图 绘制分离并纯化的细胞核与线粒体图（高倍镜下）。 6. 讨论 6.1 饥饿对线粒体的形状有何影响？ 6.2 差速离心与密度梯度离心方法有什么不同？ 细胞器的染色技术和细胞分裂观察实验操作规程 1. 在实验前向学生介绍Feulgen反应的基本原理、操作方法及注意事项，并强调细胞分裂各期的主要特点。 2. 实验器 显微镜、恒温水浴锅、温度计、镊子、解剖针、刀片、剪刀、冰箱、温箱、天平、载玻片、盖玻片、 吸水纸、镜头纸、青霉素瓶、吸管、烧杯、量筒。 3. 实验材料与试剂 Carnoy液固定的大蒜根尖、洋葱根尖纵切永久制片、马蛔虫卵切片永久制片、1mol/L HCl、Schiff 试 剂、亚硫酸水溶液(漂白液)、5%三氯乙酸、0.5%固绿酒精溶液（95%的酒精溶解）。 4. 实验内容 4.1 大蒜根尖压片制作 固定大蒜根尖→DNA的酸解（60℃恒温水浴锅内8～15分钟）→Schiff试剂避光染色40～60分钟→漂 洗液漂洗 2～3 次，每次 5min→自来水流水冲洗→蒸馏水洗 2 次→切取生长区部位（染成紫红色）→压片 →镜检。 4.2 大蒜根尖有丝分裂各期观察。 4.3 洋葱根尖纵切永久制片观察（同大蒜根尖）。 4.4 马蛔虫受精卵切片永久制片观察。 5. 绘图 绘制细胞分裂各期图。 6. 讨论 6.1 简述Feulgen反应的染色原理。 6.2 比较动物细胞与植物细胞在细胞