珊瑚和海葵来源红荧光蛋白的研究和应用!.pdf

中国生物工程杂志 ， ， （）： %53’. 23+(15’+,+@6 $$H H H !$ V !E 珊瑚和海葵来源红荧光蛋白的研究和应用! !!! ! ! ! 钟卫鸿 陈建孟 陈 伟 路 争 宋艳绒 （浙江工业大学生物与环境工程学院 杭州 ） ! #!$$# （ ， ， ， ） %’() *+) %,,-,.) .’/ 0+,1-,.) 23+4567317 8’39)73(6 +* :+-(5 ;,+)3/. .=4. ;,+)3/. ##$ 8:? 摘要 绿色荧光蛋白作为标记蛋白和报告蛋白在生物学研究中应用越来越广。但在荧光共振能 量转移（ ， ）等技术中存在一些缺陷，需要更大波长范围的 *,-+)71’1 )7+’.’1 ’)@6 ().’7*) ;AB 荧光蛋白。最近研究发现了多种来源于珊瑚和海葵的红荧光蛋白，这些长波长的荧光蛋白对绿 色荧光蛋白是一种很好的代替和补充，可以实现细胞内多荧光标记，提供更理想的;AB 荧光 对。经随机突变和定点突变等方法改建获得的红荧光蛋白变种显示出更高的荧光强度，成熟时 间也更短。目前应用较多的是来源于香菇珊瑚（ ）的红荧光蛋白 。 !#$%#%’ #( C D7A/ 关键词 绿色荧光蛋白 红荧光蛋白 ;AB 标记蛋白 自从!K 年首次发现存在于水母体内的绿色 P;Q 的荧光蛋白，并开展了一系列的红色荧光蛋白 荧光蛋白（ ， ）后，人们完 等色蛋白的研究工作，发现了一些有应用价值的红 @)’ *,-+)71’( 4)+(3’ P;Q 成了P;Q 分离纯化、发光机制、结构功能、基因克 荧光蛋白。如 /);QHI# 蛋白，其最大发射波长为 ［］ 隆和融合表达等的研究，并引入到生物学和生物工 。随后， 等报 道 从香 菇珊 瑚 HI#’= ;)./S+9 程研究中作为标记蛋白或报告蛋白获得广泛应 （ ）分离到红荧光蛋白 （或 !#$%#%’ #( C /7;QHK# ［，］ ［］ 用! # ，并逐渐拓展至环境科学等领域 。为了增 D7A/）的基因，其最大发射波长达到了HK#’=，鉴 强P;Q 的应用效果和应用领域，不少研究进行了 定发现D7;QHK# 与/);QHI# 高度同源，并通过随机 ［］ E P;Q 改进 和荧光（蛋白）色的拓展工作，如通过 突变获得了/7T /);Q! 突变蛋白，使得最大发射波