骨形态蛋白2联合氯化锶对人脐带间质干细胞的增殖和成骨分化的影响.PDF

·288· 史堡塞墅处登盘盍垫!!生；旦笙垫鲞筮!翅￡!也』垦翌坠强z呈生坐!型垫!!：坠!：蛰：塑!：! ·实验研究· 骨形态蛋白2联合氯化锶对人脐带间质 干细胞的增殖和成骨分化的影响 杨大志贺永进郭晓东 郑启新 【摘要】 目的观察骨形态发生蛋白-2(BMP一2)联合氯化锶对人脐带间充质十细胞(hUCM． SC)的增殖和分化的影响。方法体外培养hUCMSC，实验分为3组，窄自组：10％胎牛疵清+ DMEM培养基，对照组：10％胎牛血清+DMEM培养基+成骨培养基，实验组：10％胎牛血清+ DMEM培养基+BMP-2+氯化锶，噻唑蓝(MI*F)比色法观察hUCMSC的增殖效果，并检测3组不同 培养基培养后hUCMSC的碱性磷酸酶(ALP)活性变化，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测量不同组 hUCMSC的骨桥蛋白(OPN)、ALP、I莲!!胶原蛋白(COLI)的mRNA表达，蛋白印迹法检测Smad和 kossa染色实验观察人脐带间充质于细胞钙结节的形成。结果实验组 p38蛋白表达的变化。Von 的hUCMSC增殖率在第5天和第7天明显高于空白组和对照组(P0．05)。实验组细胞在第5天， 4-17．011)U／g．prot，在第14天，实验 碱性磷酸酶活性由(33．443±9．061)U／g．prot增加到(80．209 组的碱性磷酸酶活性可以高达(145．705±45．871)U／g．prot，与空白组和对照组比较都有明显增加 (P0．05)。在实验组人脐带间充质干细胞的碱性磷酸酶(ALP)mRNA出现高表达(P0．05)。空 白组的OPN表达很弱，而对照组和实验组的OPN出现明显的表达(P0．05)。对比空白组和对照 组，实验组COLI的表达可见明显增强(P0．05)。实验组中hUCMSC的Smadl／5／8蛋白m现高表 达(Po．05)。空自组的p38蛋自表达很弱，而对照组和实验组的p38蛋白出现明显的表达(P 0．05)，含有BMP-2和氯化锶的培养基中培养28d后，可以看到hUCMSC形成大量的钙结节。结论 联合骨形态发生蛋白_2和氯化锶对hUCMSC细胞增殖和成骨诱导分化都有促进作用。 【关键词】骨形态发生蛋白-2；脐带；间充质十细胞；成骨分化 Influenceofbone andstrontiumchlorideonthehumanumbilicaIcord morphogenetieproteins-2 YANG stemcells and differentiationDa—zht．HE mesenchymalproliferationosteogenic YOI嘱-fin． GUO of Medical Xiao—do孔g。zHENGQi·xin．DepartmentOrthopaedics，UnionHospital，rondiCollege， Scienceand HuazhongUniversityof Technology。Wuhan430030．China ‘ Correspondingauthor：zHENGQi．xin。Email：zh州一qx@163．corn of of To thee舵ctscombinationbone Objectivestudy morphogeneticprotein-2(BMP· 【Abstract】