转Bt基因作物杀虫蛋白土壤残留及检测研究进展.pdf

生物技术通报 BIOTECHN OLOG Y B ULLETIN 2006 B t 赵清 崔金杰 李树红 雒 瑜 王春义 ( , 455000) : 随着转B t 基因作物的大面积推广和应用, 其释 的毒蛋白在土壤中的残留及对土壤生态系统的影 响等问题已经成为人们关注的热点国内外学者们通过室内构建大田模拟模型的方法对土壤中残留的 B 毒蛋白 进行了研究, 并取得了显著的进展土壤是生态系统中物质循环和能量转化过程的主要场所, 转B t 基因植物的外 源基因表达的 B 毒蛋白可以通过植株残体根及根系分泌物和花粉的散播等途径进入土壤生态系统, 这些高度特 化了的 B 毒素蛋白 一旦在土壤中积累, 将会导致土壤特异生物功能类群以及土壤多样性发生改变, 甚至产生级联 效应大量研究表明, 苏云金芽孢杆菌产生的 B 毒蛋白进入土壤后, 可与土壤粘粒和腐质酸迅速结合, 不易分离, 而且较之游离态, 更难被土壤微生物降解纯化的 B 毒蛋白与无菌土壤中活性颗粒紧密结合后, 存留时间至少可 达 234 d虽然结合态的 B 蛋白用酶联免疫法( EL ISA ) 方法检测不到, 但生物测定表明其仍保持杀虫活性对转 B t基因作物的研究表明, B 棉组织埋入土壤 7d 内, 土壤中可提取的杀虫晶体蛋白浓度快速下降, 之后下降速度比 较稳定, 甚至维持数周不变而 B 玉米根系分泌物和植株残体释 的杀虫晶体蛋白在土壤中至少保持 180d 杀虫 活性虽然关于 B 毒蛋白在土壤中存留时间的长短, 可能因实验材料试验方法和条件的不同而不同但是总 之, 如果长期种植转B t基因作物, 很可能会造成 B 毒蛋白在土壤中的积累, 并最终威胁到整 个土壤生态系统的平 衡目前对土壤中 B 毒蛋白定性和定量检测的方法主要有印迹分析法( W es ern-b lo ing) SD S法斑点印迹 酶联免疫吸附法 ( do -b lo EL ISA ) 流式细胞仪法 ( F low cy om e er, FCM ) EL ISA 平板试剂盒及试剂条和生物测定 法其中最直接简易准确的方法是 EL ISA 平板试剂盒及试纸条快速检测法和生物测定法但检测土壤残留 B 毒蛋白时, 采用的方法不同, 检测的结果也有差异 : 转B t基因作物 B 毒蛋白 土壤残留 生态风险 Research Advances in Soil R emaining andM onitor of Toxins P rotein Released by Transgenic B t Crops Zhao Q ing Cu i J injie L i Shuhong Luo Junyu W ang Chuny i ( Cotton R esearch Institu te, CAAS, A ny ang H enan 455004) Abstract: W ih he large a rea popu lariza ion and applica ion o f ransg en icB t crop s, such ques ions as i s ox in pro- e in residue in he so il and mi pac on so il ecosys em released, e c. have already becom e concerned focu ses of people. D o- m es ic and in erna iona l scho lar s ruc u re land fo r g row ing f ie ld crop s m e hod, s mi