转人工改造的BtCry1Ac基因中林美荷杨的获得及其抗虫性分.PDFVIP

中国农学通报 2014,30(28):23-28 Chinese Agricultural Science Bulletin 转人工改造的BtCry1Ac基因中林美荷杨的 获得及其抗虫性分析 1 1 1 1 2 1 1 王亦学 ，郝曜山 ，杜建中 ，张欢欢 ，吴家和 ，秦永军 ，孙 毅 1 2 （山西农业科学院生物技术研究中心，太原030031 ；中国科学院微生物研究所，北京100101） 摘 要：中林美荷杨具有适应性强、雄性不飞絮、速生丰产和耐瘠薄等优良性状，然而受到一些害虫的危 害，造成树苗生长不良，严重影响苗木的产量和质量。采用中林美荷杨的叶片和节间组织作为外植体， 通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将人工改造后的抗虫基因Bt Cry1Ac导入杨树基因组 中。对所获得的中林美荷杨转基因植株进行PCR 、Southern blotting 和Real-time PCR 等分子生物学检 测，结果表明Bt Cry1Ac基因多以单拷贝整合到受体植物基因组中，其中7 个转基因株系显示外源基因 有较高的转录表达。经过实验室喂虫鉴定，筛选出2 个抗性效果好的株系。中林美荷杨转抗虫基因株 系的获得为该品种绿化造林和推广提供了条件。 关键词：中林美荷杨；Cry1Ac基因；遗传转化；抗虫性 中图分类号：S718.3 文献标志码：A 论文编号：2014-1396 RecoveryofTransgenicPopulusPlantswithModifiedBtCry1Ac Geneand TheirInsect-resistanceAssay 1 1 1 1 2 1 1 WangYixue,HaoYaoshan,DuJianzhong,ZhangHuanhuan,WuJiahe,QinYongjun,SunYi 1 (BiotechnologyResearchCenter,ShanxiAcademyofAgriculturalSciences,Taiyuan030031; 2InstituteofMicrobiology,ChineseAcademyofSciences,Beijing100101) Abstract:Populus sp.is afine varietywithwideadaptability,malewithoutcatkins,fast-growing,highyield andenduringbarren.However,pestsdamagetheproductionandqualityofthiswood.Toenhanceinsect resistanceofPopulus sp., Cry1Ac genewas introducedintopoplarviaAgrobacterium-mediatedtransformation withexplantsofleavesandinternodes.Theintegrationofthetargetgeneintothepoplargenomewasidentified byPCRandSouthernblottinganalyses.Real-timePCRanalysesindicatedtheexpressionof Cry1Ac g