α7亚基烟碱乙酰胆碱受体在右美托咪定防治内-中华危重病急救医学.PDFVIP

中华危重病急救医学  2016年2月第28卷第2期  Chin Crit Care Med，February 2016，Vol.28，No.2 · 127  · ·论著· α7亚基烟碱乙酰胆碱受体在右美托咪定  防治内毒素血症小鼠谵妄中的作用           ， 430071   ： ， ： Email drljg1817@163.com DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-4352.2016.02.009 【 】 摘要 目的  观察α7亚基烟碱乙酰胆碱受体（α7nAChR）在右美托咪定（DEX）防治内毒素血症谵妄 发生中的作用，并探讨其作用机制。方法  将100只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组（NS 组）、DEX对照组、 脂多糖（LPS）诱导内毒素血症模型组（LPS组）、DEX保护组（DEX+LPS组）、α-银环蛇毒素 拮抗组（α-BGT+DEX+LPS组），每组20只。采用腹腔注射LPS 20 mg/kg制备内毒素血症模型，NS组和DEX 对照组给予等量生理盐水。DEX对照组、DEX+LPS组和α-BGT+DEX+LPS组小鼠于制模前15 min腹腔注 射DEX 40 μg/kg，α-BGT+DEX+LPS组于注射DEX前15 min腹腔注射α7nAChR抑制剂α-BGT 1 μg/kg； NS组给予等量生理盐水。制模前及制模后24 h每组取10只小鼠进行旷场实验，实验结束后处死小鼠留取标 本，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）水 平，蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测海马组织胆碱乙酰转移酶（ChAT）及乙酰胆碱酯酶（AChE）表达 量。另取10只小鼠行新物体识别实验，观察训练阶段探究总时间及制模后3 h和24 h的偏好指数。结果  NS 组和DEX对照组各项指标比较差异均无统计学意义。① 旷场实验结果显示，制模前各组旷场实验观察指标 均无差异。制模后24 h，与NS组比较，LPS组小鼠表现为对新环境的认知、 学习和记忆能力均下降，紧张度增 加；DEX可明显改善小鼠的上述变化；而α-BGT可部分拮抗DEX对谵妄小鼠的保护作用。② 新物体识别 实验结果显示，与NS组比较，LPS组小鼠探究新事物的能力下降；DEX可改善小鼠的探究能力；而α-BGT可 拮抗DEX的保护作用。③ ELISA结果显示，LPS组血清TNF-α和NSE水平较NS组明显升高，DEX可抑制 LPS诱导的血清TNF-α和NSE水平升高，而α-BGT可拮抗DEX的保护作用〔NS组、LPS组、DEX+LPS组、 α-BGT+DEX+LPS组TNF-α（ng/L）分别为23.72±3.13、808.78±87.86、192.96±31.47、829.99±80.98，NSE （μg/L）分别为8.70±0.74、25.90±3.03、18.10±2.14、23.12±2.21，均P ＜0.01〕。④ Western Blot结果显示，与 NS组比较，LPS组海马组织ChAT表达明显下降，AChE表达明显升高，DEX可逆转ChAT和AChE的表达变化， 而α-BGT可拮抗DEX的保护作用〔NS组、LPS组、DEX+LPS组、α-BGT+DEX+LPS组ChAT（灰度值）分别 为1.536±0.150、0.381±0.138、0.914±0.173、0.628±0.088，AChE（灰度值）分别为0.382±0.201、1.843±0.325、 0.898±0.155、1.470±0.220，P ＜0.05或P ＜0.01〕。结论  内毒素血症小鼠可发生谵妄等认知功能障碍；DEX 可通过调节脑内神经递质AChE和ChAT的表达量而改善谵妄症状，从而起到脑保护作用，其机制可能与 α7nAChR有关。 【 】 关键词 内毒素血症；  谵妄；  右美托咪定；  乙酰胆碱；  α7亚基烟碱乙酰胆碱受体 基金项目：国家自然科学基金 Role of α7 nicotinic acetylcholine receptor in attenuation of endotoxin induced delirium with dexmedetomi