香水百合鳞片组织培养再生体系的建立.PDFVIP

维普资讯 江苏农业科学 2008年第4期 一 83一 香水百合鳞片组织培养再生体系的建立 李冰华，金晓玲，刘雪梅 (中南林业科技大学环境艺术设计学院，湖南长沙410004) 摘要：为了建立稳定的百合组织培养再生体系，选用香水百合鳞茎的鳞片作为外植体 ，对激素的种类和浓 度 、鳞片在鳞茎中的部位等对小鳞茎诱导的影响进行研究。结果表明，植物激素的种类和浓度对鳞茎的诱导和生 根有显著影响，诱导鳞茎和生根的最适培养基为 1／2MS+2．0mg／L2，4一D+0．5mg／LNAA+0．5mg／LKT。鳞 片的部位对鳞茎和愈伤组织的诱导也有显著的影响 ，其中内部鳞片的分化能力大于中部和外部鳞片。 关键词：香水百合；组织培养；鳞片；再生体系 中图分类号：$603．8 文献标志码：A 文章编号 ：1002—1302(2008)04—0083—03 香水百合 (Lillumspp．)是百合科百合属东方百 冲洗2h，在无菌条件下用 70％的酒精浸泡30s，蒸 合杂交系统的多年生草本植物。其花色艳丽，芳香 馏水冲洗 3次，然后用0．1％升汞浸泡8rain，再用 宜人，叶片青翠娟秀，茎秆婷婷玉立，是盆栽和点缀 无菌水冲洗8次。在超净工作台上把它们分别接种 花园、庭院的名贵花卉，也是世界各地广泛应用的切 于不同的分化培养基上。 花材料。香水百合为杂交种，有性繁殖后代易出现 1．3 不定芽的诱导、分化和增殖 性状分离，并且播种苗的生育周期较长，通常采用分 根据鳞片生长部位，分外、中、内层 3个部分剥 鳞茎、分珠芽、扦插的无性繁殖方法进行繁殖，但种 离鳞片，均取其下部，凸面朝下分别接种于分化培养 球易退化，繁殖系数也比较低。利用组织培养技术 基上。将萌发的小鳞茎切下转入继代培养基，进行 既可以达到快速繁殖的目的，又可以脱去病毒，还可 增殖培养。 以与基因工程相结合，为植物育种提供新方法。自 1．4 生根及移栽成苗 1957年 Robb_l首次发表 了百合的组织培养文章 将直径约 1am的鳞茎接种到生根培养基上，生 后，已经建立了40多种方法用于百合遗传转化受体 根苗移栽到珍珠岩与草炭土 1：1混合的基质中。 系统_2J。目前，百合的许多器官和组织都已通过组 1．5 培养条件 织培养方法诱导成苗，如鳞片、叶片、茎段、珠芽、花 基本培养基均用 1／2MS固体培养基，分别附加 柱、子房、花丝等 J。其中，以鳞片为外植体的应用 不同浓度的激素。培养基 内加蔗糖30g／L，琼脂6．5 最为广泛，成功率也最高 。本试验通过对香水 g／L，pH值为5．8左右，培养温度 (24-4-1)oC，光照 百合鳞片组织培养技术的研究，建立稳定的快速繁 强度 1500lx，光照时长为 14h／d。 殖体系，为百合的遗传转化和基因工程育种提供试 2 结果与分析 验材料。 2．1 外源激素对百合鳞片离体培养不定芽分化和 1 材料与方法 增殖的影响 1．1 供试材料 将鳞片接种在 1／2MS附加不同激素的培养基 试验用香水百合鳞茎 由长沙市花卉市场购得 。 上，12d后开始出现突起状小球体，球体逐渐膨大， 1．2 外植体的消毒 15d左右分化出芽，形成小鳞茎。由香水百合鳞片