甘油发酵生产3－羟基丙酸的代谢改造工程菌研究-食品与发酵工业.PDF

1—1802／ts．201506044 DOI：10．13995／j．cnki．1 甘油发酵生产3-羟基丙酸的代谢改造工程菌研究进展+ 牛坤，秦海彬，柳志强，郑裕国 (浙江工业大学生物与环境工程学院，浙江杭州，310014) 摘 要 3一羟基丙酸是一种重要的平台化合物，可以用来合成许多重要的化工中间体及工业化工产品，被美国 能源部列为当前最具潜力的12种化工产品之一。文中就近年来以大肠杆菌(Escherichiacoli)和肺炎克雷伯氏 菌(Klebsiella pneumoniae)作为宿主进行代谢改造合成3．羟基丙酸的相关研究进行了总结，介绍了当前以甘油 为底物发酵合成3-羟基丙酸的主要研究成果，并针对目前存在的问题加以展望，旨在为3一羟基丙酸的工业化生 产提供参考。 关键词 甘油；3一羟基丙酸；甘油脱水酶；醛脱氢酶 随着煤炭石油等不可再生资源的13益减少，潜力 1 以甘油为底物合成3-HP的主要途径及 巨大的燃油生物炼制技术受到了越来越多的关注，其 关键酶 中，生物柴油产业更是在近几年内迅速发展。然而， 每生产10t生物柴油就会产生lt甘油…，随着全球 目前，市售的3一HP均由化学合成法制得“J。 各国生物柴油产业不断发展，必将对国际甘油市场形 具体方法包括：由B-羟基丙腈与NaCN水解反应制 成极大的冲击。为了解决这一问题，业界兴起了以甘 备3一HP；丙烯酸在高温或液酸催化下生成3．HP；金 油为原料生产高附加值化学品的热潮。 属铂催化3．羟基丙醛生成3．HP等。但是，以上途 甘油具有特殊的物理性质和化学结构，广泛应用 径中原材料多为非可再生资源，且易造成环境不兼 于医药、食品、化妆品以及工业化工产品等领域’2o。 容、成本高、产品分离纯化复杂等问题，因此依靠上 而研发甘油的革新用途，建立其下游化学品开发利用 述途径进行3一HP的大规模生产存在一定的局 的有效途径，也成为近年来科学家不断探索的新问 限性。 题，当前利用甘油的有效途径包括：生产乙醇、制备 随着基因工程技术的发展，生物法替代化学法合 1，3一丙二醇、合成环氧氯丙烷、生产乙二醇、生产乳 成大宗化学品已经得到广泛的研究，在此基础上，研 酸、合成二羟基丙酮及3．羟基丙酸等¨1。 究学者尝试采用生物法合成3一HP。目前生物法合成 3．HP主要有两种途径，一是以葡萄糖为底物；二是以 3一羟基丙酸(3一hydroxypropionicacid，3一HP)是一 甘油为底物。甘油在微生物体内可以通过氧化反应 种无色无味的油状液体，可与水、醇、醚等多种溶剂互 和还原反应2种方式进行代谢。如图1所示，在氧化 溶。3一HP为三碳无手性有机化合物，具有羧基和羟 途径中，甘油首先经过甘油脱氢酶(GDH)催化生成 基两种官能团，这使得3．HP具有优良的化学性质， 二羟基丙酮(DHA)，然后进一步代谢生成磷酸二羟 如脱水生成丙烯酸，氧化生成有机酸等。同时3．HP 丙酮(DHAP)，最终进入糖酵解途径生成丙酮酸，并 也是一种重要的化学中间体，可以用来合成很多重要 为菌体的生长提供所需要的能量ATP和还原力NAD 的工业化工产品，如涂料、胶黏剂、水处理化学品和个 (P)H。在还原途径中，甘油首先经过甘油脱水酶 人护