樟芝菌株发酵过滤液的免疫调节作用初步试验.PDF

第四章 樟芝菌株發酵過濾液的 免疫調節作用初步試驗 前 言 免疫製劑可分為免疫增強劑和免疫抑制劑兩大類，前者的效應特點是促進 免疫功能，而後者表現為對免疫應答的抑制。癌症為目前難病之一，癌症化學 療法的副作用很多，尤其對於免疫的抑制作用，若能減輕這些副作用，可提高 化療的品質。衛生署公告的 「健康食品之免疫調節功能評估方法」主要針對前 者，至於抗過敏及減輕化療副作用的評估方法已準備研擬中。 樟芝價格昂貴，若能對難病的治療有幫助才能顯現其價值。真菌類植物所 含的多醣體在免疫功能的效用備受重視，因此樟芝發酵液是否也有這方面的效 用值得探討。本章研究的主要目的是利用簡單的活體內(in vivo) 試驗探討樟芝 發酵液是否能減輕化療藥物 cyclophosphamide 、5-fluorouracil 的免疫抑制作 用，及是否具有抗過敏作用。 又同為化療藥物的 cisplatin 系經由自由基的作用引起嚴重腎毒性 (Matsushima et al., 1998) 。佐劑型關節炎(Adjuvant arthritis)是細胞免疫、免疫 複合物所引起的炎症反應，是研究抗風溼性藥物的重要動物模式 (Hiroi et al., 1988) ，在本章試驗中也一併探討樟芝發酵液對這些的效果，提供樟芝發酵液 進一步開發為保健食品的參考。 材 料 及 方 法 58 一、樟芝菌株發酵過濾液(簡稱樟芝發酵液)之製備 詳第二章材料與方法。 二、動物 使用 Wistar 品系雄性大白鼠，或 ICR 鼷鼠，購自國科會動物中心。餵養 環境維持 22 3℃，相對濕度 55 5 % ，明、暗各十二小時的環境。餵食標準 飼料(福壽公司) ，自動飲水系統供水。 三、對 cyclophosphamide 、5-fluorouracil 及 cisplatin 的影響 (一) 對 cyclophosphamide 的影響 對 cyclophosphamide 的影響參照 Qian et al. (1997) 及 Chevreau et al. (1995)的方法，腹腔注射 cyclophosphamide 100 mg/kg 前 3 天起，每天經口投 予樟芝發酵液一次，持續至 cyclophosphamide 給藥後 7 天。實驗終了，在乙 醚麻醉下，由腹腔靜脈採血，供血液學檢驗；取出脾臟稱重比較之。 (二) 對 5-fluorouracil 的影響 對 5-fluorouracil 的影響參照 Chevreau et al. (1995) 的方法，腹腔注射 5-fluorouracil 420 mg/kg 前 3 天起，鼷鼠每天經口投予樟芝發酵液一次，持續 至 5-fluorouracil 給藥後 7 天。實驗終了，在乙醚麻醉下，由腹腔靜脈採血， 供血液學檢驗。取出胸腺、脾臟稱重比較之。 (三) 對 cisplatin 的影響 參照 Matsushima et al. (1998)的方法，大鼠靜脈注射 cisplatin (5 mg/kg) ，樟 芝發酵液每天經口投與，每天稱體重。第五天在乙醚麻醉下由腹靜脈採血，供 血清生化學檢驗 (creatinine, blood urea nitrogen 為主) 。於第五天大鼠犧牲前於 59 代謝籠收集尿液 6 小時供測定 creatinine ，並算出creatinine clearance 。 Creatinine clearance = urinary creatinine urinary volume / hrs / serum creatinine 四、抗發炎 (一) 足蹠浮腫 使用雄性大鼠，樟芝發酵液於實驗前 1 小時經口投與。在右後腳足蹠皮下 注入 1 % (carrageenan) ，使用容