高效液相色谱和液相色谱鄄电喷雾质谱联用法鉴定辛硫磷在鲫鱼肝.PDF

第4 1 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第6 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2013 年6 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 893 ~898 DOI:10.3724/ SP.J.1096.2013.20701 高效液相色谱和液相色谱鄄电喷雾质谱联用法鉴定 辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中代谢产物及途径 * 刘荣飞摇 刘 幸摇 刘晓宇摇 范雯婷摇 赵冬冬摇 石旺荣摇 朱雨田摇 李 宏 (华中农业大学食品科技学院,武汉430070 ) 摘摇 要摇 采用差速离心法制备鲫鱼肝微粒体,选择已经建立的肝微粒体系统进行体外孵育,研究有机磷杀虫 剂辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中的代谢。 产物经乙酸乙酯萃取2 次,取出有机相于40益下旋转蒸发至近干,加 1 mL 甲醇,经高效液相色谱(HPLC )分离测定,液相色谱鄄电喷雾质谱联用(LC鄄ESI/MS )鉴定其分子结构,发 现了3 种代谢产物(M1 :二乙基硫代磷酸;M2 :四乙基二硫代焦磷酸;M3 :辛氧磷),据此推断辛硫磷在鲫鱼肝 微粒体(细胞色素P450 酶系)的作用下进行了脱硫氧化、水解反应。 从而可推断辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中的 代谢途径和代谢特点,为进一步研究其体内代谢和代谢酶奠定基础。 关键词摇 辛硫磷;鲫鱼;肝微粒体;体外代谢;液相色谱鄄电喷雾质谱联用 1摇 引摇 言 自20世纪80年代起,我国有机磷农药工业进入了高速发展的阶段。 由于有机磷农药具有高效、广 [1] 谱、低毒、抗性发展缓慢、价格低廉等特点,在防治农业生产害虫大爆发时发挥了极其重要的作用 。 但与此同时,其污染效应也扩展到整个生态系统。 曾有报道指出,在农药的使用过程中,仅有 1%左右 的农药作用于靶生物,其余残留于土壤或通过地表径流进入水环境,从而对土壤生物和水生生物造成危 [2] 害,导致生态平衡被破坏 。 我国农药生产总量中有机磷农药仍然是主要的农药品种,占杀虫剂总量 [3] 的70% 。 有机磷农药主要是使乙酰胆碱酯酶(AChE)活性中心的丝氨酸羟基磷酰化,从而使其丧失 水解乙酰胆碱的能力,造成乙酰胆碱大量蓄积,引起胆碱能神经和部分中枢神经功能的过度兴奋,继而 [4,5] 转入抑制和衰竭,产生中毒症状,同时其代谢产物的毒性作用有可能比母药更大 。 辛硫磷,又名肟硫磷、倍腈松、腈肟磷,化学名 O,O鄄二乙基鄄O鄄(苯乙腈酮肟)硫代磷酸酯,分子式为 C H N O PS。 由于其具有高效、广谱、安全及对人畜低毒的特点,因而在我国被广泛用于农业生产中, 12 15 2 3 在水产养殖业也被用作渔药。 因而通过研究其在水产品中的代谢产物及途径,可明确其对水产品的危 害程度,对保障水产品安全具有积极意义。 迄今,关于有机磷农药在水产品中的代谢研究鲜见报道。 目前,有机磷农药残留检测方法主要有色谱法和快速检测法两大类。 色谱法是目前农药残留主要 [6] [7] 的检测方法,包括气相色谱法(GC) 和气相色谱鄄质谱联用法(GC鄄MS) 、高效液相色谱法(HPLC)和 [8] 高效液相鄄质谱联用法(HPLC鄄MS) 等。 其特点是检测时间略长,但准确度和精密度高,可为有机磷